β-PIXの喪失は、局所接着分解を阻害し、ミオシン軽鎖活性化を介してケラチノサイトの運動性を促進します

皮膚の治癒中に、角化細胞の細胞骨格と焦点癒着（FAS）を含むそれらのマトリックス癒着が再編成されます。これらの変化は、グアニンヌクレオチド交換因子β-PIX（ARHGEF7とも呼ばれる）を含む、小さなGTPaseとその調節因子によって調整されます。線維芽細胞では、β-PIXは小さなGTPaseを活性化し、それにより移動を促進します。in vitroのケラチノサイトでは、β-PIXがFASに局在します。β-PIX機能を研究するために、β-PIXノックダウンケラチノサイトを生成しました。β-PIXノックダウン細胞単層の創傷閉鎖中、FAの分解が損なわれ、その数とサイズが増加します。さらに、β-PIXノックダウン細胞では、リン酸化ミオシン軽鎖（MLC、MyL2としても知られている）が、創傷前面の細胞の先端だけでなく、前面に続く細胞にも存在しますが、MLCキナーゼ（MYLK）のレギュレーターであるP21活性化キナーゼ2（PAK2）も誤って導入されます。MyLKの阻害または枯渇は、β-PIXノックダウン細胞のFA分布を回復します。β-PIXノックダウン細胞によって生成される牽引力は、コントロール細胞のものと比較して増加し、その結果、そのような細胞の単一β-PIXノックダウン細胞と単層の移動における予期しない増強と一致します。β-PIXを標的とすることは、in vivoでの創傷の上皮化を促進する手段かもしれないと提案します。

During healing of the skin, the cytoskeleton of keratinocytes and their matrix adhesions, including focal adhesions (FAs), undergo reorganization. These changes are coordinated by small GTPases and their regulators, including the guanine nucleotide exchange factor β-PIX (also known as ARHGEF7). In fibroblasts, β-PIX activates small GTPases, thereby enhancing migration. In keratinocytes in vitro, β-PIX localizes to FAs. To study β-PIX functions, we generated β-PIX knockdown keratinocytes. During wound closure of β-PIX knockdown cell monolayers, disassembly of FAs is impaired, and their number and size are increased. In addition, in the β-PIX knockdown cells, phosphorylated myosin light chain (MLC; also known as MYL2) is present not only in the leading edge of cells at the wound front, but also in the cells following the front, while p21-activated kinase 2 (PAK2), a regulator of MLC kinase (MYLK), is mislocalized. Inhibition or depletion of MYLK restores FA distribution in β-PIX knockdown cells. Traction forces generated by β-PIX knockdown cells are increased relative to those in control cells, a result consistent with an unexpected enhancement in the migration of single β-PIX knockdown cells and monolayers of such cells. We propose that targeting β-PIX might be a means of promoting epithelialization of wounds in vivo.