トリパノソーマCruzi cruziメタサイクリック段階特異的表面分子GP90による宿主細胞リソソームの阻害は、寄生虫の浸潤をダウンレギュレーションします

Chagasの病原体であるTrypanosoma Cruziによる感染の成功は、Metacyclic Trypomastigote（MT）の形態による宿主細胞の浸潤に大きく依存しています。2つの主要なメタサイクリック段階特異的表面分子、GP82およびGP90は、in vitroでの標的細胞浸潤とマウスの口腔T. cruzi感染において決定要因を果たします。T. cruzi株の間で高度に保存されているGP82の構造と特性はよく知られています。GP90の情報は依然としてかなりまばらです。ここで、私たちはそのギャップを埋めようとしました。GP90は、侵襲性の低いG株MTから精製され、高レベルでGP90を発現させ、HELA細胞リソソーム拡散を阻害し、GP82を介したCL株MTのGP82を介した内在化は、低レベルの低レベルのGP90分子を発現します。GP90の保存されたC末端ドメインを含む組換えタンパク質は、ネイティブG株GP90と同じ特性を示しました。それは、組換えGP82によって誘導される宿主細胞リソソーム拡散を打ち消し、CL株MTによるHELA細胞浸潤に阻害効果を示しました。GP90 C末端ドメインにまたがる合成ペプチドを使用して、MT浸潤のダウンレギュレーションの特性に関連するGP90配列を識別するアッセイにより、Gvlytadkewのシーケンスが明らかになりました。これらのデータに加えて、リソソーム拡散がCl株MTとのHELA細胞の相互作用により誘導されたが、G株MTとではなく誘導され、混合感染CL株MT内部化がG株MTによって阻害されたことを示唆していることを示唆していることを示唆している。リソソーム拡散は、GP90分子がそのダウンレギュレーションの役割を及ぼすメカニズムです。

Successful infection by Trypanosoma cruzi, the agent of Chagas' disease, is critically dependent on host cell invasion by metacyclic trypomastigote (MT) forms. Two main metacyclic stage-specific surface molecules, gp82 and gp90, play determinant roles in target cell invasion in vitro and in oral T. cruzi infection in mice. The structure and properties of gp82, which is highly conserved among T. cruzi strains, are well known. Information on gp90 is still rather sparse. Here, we attempted to fill that gap. gp90, purified from poorly invasive G strain MT and expressing gp90 at high levels, inhibited HeLa cell lysosome spreading and the gp82-mediated internalization of a highly invasive CL strain MT expressing low levels of a diverse gp90 molecule. A recombinant protein containing the conserved C-terminal domain of gp90 exhibited the same properties as the native G strain gp90: it counteracted the host cell lysosome spreading induced by recombinant gp82 and exhibited an inhibitory effect on HeLa cell invasion by CL strain MT. Assays to identify the gp90 sequence associated with the property of downregulating MT invasion, using synthetic peptides spanning the gp90 C-terminal domain, revealed the sequence GVLYTADKEW. These data, plus the findings that lysosome spreading was induced upon HeLa cell interaction with CL strain MT, but not with G strain MT, and that in mixed infection CL strain MT internalization was inhibited by G strain MT, suggest that the inhibition of target cell lysosome spreading is the mechanism by which the gp90 molecule exerts its downregulatory role.