ワクチン送達システムとしてのエレクトロポレーションおよびマカク中のプラスミドDNAの皮内投与への自然補助剤

in vivo Electroporation（EP）は核酸の取り込みを強化するために使用され、DNAワクチン接種とのその関連は、皮膚​​を介して送達されるワクチン抗原に対する免疫応答を大いに刺激します。しかし、皮膚細胞の挙動に対するEPの効果、免疫細胞の動員のダイナミクス、および局所的な炎症因子は完全には説明されていません。ここでは、皮内DNAワクチン接種とEPと組み合わせて、非ヒト霊長類の表皮と皮下皮膚筋肉に抗原発現を拡張することを示します。in vivo繊維繊維共焦点顕微鏡と動的なex vivoイメージングは​​、EPがランゲルハンス細胞（LC）の可動性と、表皮からの移動の前にトランスフェクトされた細胞との相互作用を促進することを明らかにしました。ワクチン発現のピーク時に、表皮の損傷したケラチノサイト領域の抗原を検出し、皮膚、皮下皮膚筋、皮下筋の動員免疫細胞を特徴づけました。EPのみで、皮膚に炎症誘発性サイトカインの産生を誘導するのに十分であり、形質転換成長因子（TGF） - アルファおよびIL-12の局所濃度を有意に増加させました。我々の結果は、皮膚のEPに反応した炎症プロセスの速度論を示しており、ワクチンアジュバントとしてのその可能性を明らかにしています。

In vivo electroporation (EP) is used to enhance the uptake of nucleic acids and its association with DNA vaccination greatly stimulates immune responses to vaccine antigens delivered through the skin. However, the effect of EP on cutaneous cell behavior, the dynamics of immune cell recruitment and local inflammatory factors, have not been fully described. Here, we show that intradermal DNA vaccination combined with EP extends antigen expression to the epidermis and the subcutaneous skin muscle in non-human primates. In vivo fibered confocal microscopy and dynamic ex vivo imaging revealed that EP promotes the mobility of Langerhans cells (LC) and their interactions with transfected cells prior to their migration from the epidermis. At the peak of vaccine expression, we detected antigen in damaged keratinocyte areas in the epidermis and we characterized recruited immune cells in the skin, the hypodermis and the subcutaneous muscle. EP alone was sufficient to induce the production of pro-inflammatory cytokines in the skin and significantly increased local concentrations of Transforming Growth Factor (TGF)-alpha and IL-12. Our results show the kinetics of inflammatory processes in response to EP of the skin, and reveal its potential as a vaccine adjuvant.