VILLIN：腸微小ヴィルスの主要なマイクロフィラメント関連タンパク質

腸微小鳥のマイクロフィラメントコアのアクチンに関連する主要なタンパク質が精製されています。私たちがVillinという名前を提案するこのタンパク質は、約95,000のポリペプチド分子量を持っています。2つの議論は、villinがマイクロフィラメントのコアをその長さを横方向に形状に結合する微小炎の膜膜の細胞質膜の細胞質側に結合する可能性があることを示唆しています。第一に、電子顕微鏡検査は、クロスフィラメントが分離された膜を含まないマイクロビルスコアに付着したままであることを示しています。クロスフィラメントタンパク質の予想される存在量の計算は、これらの構造を説明するのに十分な量でvillinのみが存在することを示しています。第二に、アクチンまたはビリンに対する抗体による微小ヴィルスコアの装飾、およびサンドイッチ手順でフェリチン標識第2抗体が続くと、どちらの場合もコアの特定の標識をもたらします。しかし、アンチビリンの装飾は、VillinがF-アクチンマイクロフィラメントコアから投影するモデルと一致して、直径が大幅に増加することをもたらします。ヴィリンは、非筋肉細胞の微小固定液の膜固定に関与することが示唆されているタンパク質であるアルファ - アクチニンとは異なります。2つのタンパク質は分子量が異なります。ビリンとアルファ - アクチニンに対する特定の抗体は、免疫学的交差反応性を示さない。免疫蛍光顕微鏡では、ヴィリンはブラシ境界の微小ヴィリに位置しているのに対し、アルファ - アクチニンは微villiには存在しないが、末端のウェブに見られることが明らかになります。さらに、ビルリンは、アルファ - アクチニンが豊富な組織培養細胞のマイクロフィラメント束には見られません。したがって、ビリンとアルファ - アクチニンは免疫学的および機能的に異なるタンパク質であるように見えます。

The major protein associated with actin in the microfilament core of intestinal microvilli has been purified. This protein, for which we propose the name villin, has a polypeptide molecular weight of approximately 95,000. Two arguments suggest that villin may be the microvillus crossfilament protein that links the microfilament core laterally down its length to the cytoplasmic side of the plasma membrane. First, electron microscopy shows that crossfilaments stay attached to isolated membrane-free microvillus cores. Calculation of the expected abundance of the crossfilament protein shows that only villin is present in sufficient quantity to account for these structures. Second, decoration of microvillus cores by antibodies to either actin or villin, followed by ferritin-labeled second antibody in a sandwich procedure, results in specific labeling of the cores in both cases. The antivillin decoration, however, gives rise to a greater increase in diameter, in agreement with a model in which villin projects from the F-actin microfilament core. Villin is distinct from alpha-actinin, a protein suggested to be involved in membrane anchorage of microfilaments in nonmuscle cells. The two proteins differ in molecular weight. Specific antibodies against villin and alpha-actinin show no immunological crossreactivity. Immunofluorescence microscopy reveals that villin is located in the microvilli of the brush border whereas alpha-actinin is absent from the microvilli but is found in the terminal web. In addition, villin is not found in microfilament bundles of tissue culture cells, which are rich in alpha-actinin. Thus, villin and alpha-actinin appear to be immunologically and functionally different proteins.