組換えAAV-HBVベクターで導入されたマウスにおける共有閉鎖された円形DNA（CCCDNA）の検出B型肝炎ウイルス（HBV）の検出

B型肝炎ウイルス（HBV）は、CCCDNAと呼ばれるエピソーマの共有閉鎖された円形DNAミニ染色体として、感染した肝細胞に持続します。主な核転写テンプレートとして、HBV CCCDNAはウイルスライフサイクルの重要な複製の中間です。抗ウイルス療法の下での形成、維持、運命に関与するメカニズムについてはほとんど知られていない。これは主に、HBV cccDNAの形成を含むHBV複製サイクル全体を再現できる小さな免疫能力のある動物モデルの欠如によるものです。ここでは、HBV CCCDNAは、AAV-HBVで導入されたC57BL6マウスの肝臓のサザンブロット分析によって検出できることを報告します。HBV cccDNAは、AAV-HBVエピソームとともにこれらの動物の肝臓に持続します。また、HBV CCCDNAをAAV-HBVエピソームと区別するためのPCR戦略も設定しました。これらは、AAV-HBV/マウスモデルがHBV CCCDNAの調節と持続性を標的とする薬物のテストに関連する可能性があることを示唆しています。

Hepatitis B Virus (HBV) persists in infected hepatocytes as an episomal covalently-closed-circular DNA mini-chromosome, called cccDNA. As the main nuclear transcription template, HBV cccDNA is a key replication intermediate in the viral life cycle. Little is known about the mechanisms involved in its formation, maintenance and fate under antiviral therapies. This is mainly due to the lack of small immune-competent animal models able to recapitulate the entire HBV replication cycle, including formation of HBV cccDNA. Here we report that HBV cccDNA can be detected by Southern blot analyses in the liver of C57BL6 mice transduced with AAV-HBV. HBV cccDNA persists in the liver of these animals together with the AAV-HBV episome. We also set up a PCR strategy to distinguish the HBV cccDNA from the AAV-HBV episome. These suggest that the AAV-HBV/mouse model might be relevant to test drugs targeting HBV cccDNA regulation and persistence.