ラット網膜におけるフェニルエタノールアミンN-メチルトランスフェラーゼ含有ニューロン：免疫組織化学、免疫化学、および分子生物学

エピネフリン生合成酵素であるフェニルエタノールアミンN-メチルトランスフェラーゼ（PNMT）を含むラット網膜のニューロンを詳細に特徴づけようとしました。網膜のPNMT含有ニューロンの細胞体とプロセスは、免疫組織化学によって特定されました。同じ細胞における他のカテコールアミン生合成酵素の共存も調査されました。網膜および副腎におけるPNMTの調節が異なるように見えるため、網膜PNMTが副腎酵素に類似しているかどうかを判断するために、生化学的、分子生物学的および免疫化学的方法を適用しました。結果は、PNMT含有細胞には2つのタイプのPNMTを含む細胞と、他の2つのカテコールアミン合成酵素を含むPNMTを含むもの、チロシンヒドロキシラーゼ（TH）と芳香族L-アミノ酸デカルボンゼ酵素（AADC）を含むが、ドパミンベタミンではないことを示しています。-hydroxylase（DBH）。PNMTのみの細胞体は、内部核層（INL）および神経節細胞層（GCL）に局在しています。それらのプロセスは、内側の頸部層（IPL）の外側および内側の層で観察されます。INLのPNMTニューロンのごく一部のみがTHとAADCを含んでいます。これらのセルは、IPLの隣接する層にプロセスを送信します。しかし、ウシ副腎DBHに対する抗体は、ラット網膜細胞にDBHを局在させることができません。免疫化学的滴定は、網膜と副腎の両方からのPNMTが同じ免疫反応性を持っていることを示しています。さらに、PNMT-CDNAプローブは、網膜と副腎の両方から分離されたPNMT-MRNAと等しくハイブリダイズします。これらの結果は、PNMTがこれらの組織で同一であることを示しています。

We sought to characterize in detail neurons in rat retina that contain phenylethanolamine N-methyltransferase (PNMT), the epinephrine biosynthetic enzyme. Cell bodies and processes of PNMT-containing neurons in retina were identified by immunohistochemistry. The coexistence of other catecholamine biosynthetic enzymes in the same cells was also investigated. Biochemical, molecular biological and immunochemical methods were applied to determine whether retinal PNMT is similar to the adrenal enzyme, since regulation of PNMT in retina and adrenal appears to be different. The results show that there are two types of PNMT-containing cells: those containing PNMT exclusively and those containing PNMT with two other catecholamine-synthesizing enzymes, tyrosine hydroxylase (TH) and aromatic L-amino acid decarboxylase (AADC), but not dopamine beta-hydroxylase (DBH). PNMT-only cell bodies are localized in the inner nuclear layer (INL) and the ganglion cell layer (GCL). Their processes are observed in outer and inner strata of the inner plexiform layer (IPL). Only a small fraction of PNMT neurons in INL also contain TH and AADC. These cells send their processes to the adjacent stratum of the IPL. Antibodies to bovine adrenal DBH, however, fail to localize DBH in any rat retinal cells. Immunochemical titration shows that PNMT from both retina and adrenal gland has the same immunoreactivity. Furthermore, a PNMT-cDNA probe hybridizes equally with PNMT-mRNA isolated from both the retina and the adrenal gland. These results indicate that PNMT is identical in these tissues.