PKAおよびPKG関連経路を介したヒトの心臓線維芽細胞における大幅なCa2+活性化K+電流に対する一酸化窒素の影響

ヒト心線維芽細胞（HCF）は心筋で最も豊富な細胞型であり、HCFは正常な心機能を維持する上で重要な役割を果たします。ただし、心筋細胞とは異なり、HCFSの電気生理学は十分に確立されていません。心血管系では、Ca2+活性化K+（KCA）チャネルには異なる生理学的および病理学的機能があり、一酸化窒素（NO）が重要な役割を果たします。この研究では、HCFSのKCAチャネルに対するNOの潜在的な影響を調査しました。テストパルス期間中に著しい不活性化なしに、強力な振動、十分に維持された外向きのK+電流を記録し、I-V曲線で外側の整流を検出しました。これらはすべて、KCA電流に典型的な特性です。これらの電流は、イベリオオキシン（IBTX、BKCAブロッカー）でブロックされましたが、TRAM-34（IKCAブロッカー）ではブロックされませんでした。電流の振幅はSNAP（ドナーなし）で増加し、これらの増加はIBTXで阻害されました。BKCA電流に対するSNAP刺激効果は、KT5823（プロテインキナーゼG [PKG]阻害剤）または1時間[1、-2、-4]オキサジアゾロ - [4、-3-A]キノキサリン - との前処理によりブロックされました。1-One（ODQ;可溶性グアニル酸シクラーゼ阻害剤）。さらに、8-ブロモ環式グアノシン3 '、5'-モノリン酸（8-Br-CGMP）は、BKCA電流を刺激し、KT5720（プロテインキナーゼA [PKA]阻害剤）およびSQ22536（AnylyliLIll Cyclase阻害剤）（An Adenylill Cyclase阻害剤）で前処理しました。BKCA電流に対する刺激のない効果。さらに、8-ブロモ環式アデノシン3 '、5'-モノリン酸（8-BR-CAMP）がBKCA電流を活性化しました。これらのデータは、BKCA電流がHCFSのKCA電流の主なサブタイプであり、PKGおよびPKA経路を介してこれらの電流を強化することはないことを示唆しています。

The human cardiac fibroblast (HCF) is the most abundant cell type in the myocardium, and HCFs play critical roles in maintaining normal cardiac function. However, unlike cardiomyocytes, the electrophysiology of HCFs is not well established. In the cardiovascular system, Ca2+ -activated K+ (KCa) channels have distinct physiological and pathological functions, and nitric oxide (NO) plays a key role. In this study, we investigated the potential effects of NO on KCa channels in HCFs. We recorded strong oscillating, well-maintained outward K+ currents without marked inactivation throughout the test pulse period and detected outward rectification in the I-V curve; these are all characteristics that are typical of KCa currents. These currents were blocked with iberiotoxin (IBTX, a BKCa blocker) but not with TRAM-34 (an IKCa blocker). The amplitudes of the currents were increased with SNAP (an NO donor), and these increases were inhibited with IBTX. The SNAP-stimulating effect on the BKCa currents was blocked by pretreatment with KT5823 (a protein kinase G [PKG] inhibitor) or 1 H-[1,-2, -4] oxadiazolo-[4,-3-a] quinoxalin-1-one (ODQ; a soluble guanylate cyclase inhibitor). Additionally, 8-bromo-cyclic guanosine 3',5'-monophosphate (8-Br-cGMP) stimulated the BKCa currents, and pretreatment with KT5720 (a protein kinase A [PKA] inhibitor) and SQ22536 (an adenylyl cyclase inhibitor) blocked the NO-stimulating effect on the BKCa currents. Furthermore, 8-bromo-cyclic adenosine 3',5'-monophosphate (8-Br-cAMP) activated the BKCa currents. These data suggest that BKCa current is the main subtype of the KCa current in HCFs and that NO enhances these currents through the PKG and PKA pathways.