L-ロイシル-L-ロイシンメチルエステルは、システインカテプシンをサイトゾルに放出しませんが、一時的に透過性リソソームでそれらを不活性化します

L-ロイシル-L-ロイシンメチルエステル（LLOME）はアポトーシスを誘導します。これは、透過化リソソームからのリソソームシステインカテプシンの放出がサイトゾルへの放出によって媒介されると考えられています。ここで、我々はヘラ細胞で、LLOMEのアポトーシス濃度と亜アポトーシス濃度が迅速かつ完全なリソソーム膜透過化（LMP）を引き起こしたことを実証しました。10,000の質量。しかし、システインカテプシンBとLのサイトゾルへの放出の証拠はありませんでした。むしろ、彼らはリソソーム内にとどまり、そこで急速に不活性化され、劣化しました。LMP、システインカテプシン活性の喪失、カスパーゼの活性化、細胞死を含むLLOME誘発性副作用は、カテプシンCの阻害によって減少する可能性がありますが、カテプシンBおよびLを阻害することでは減少できません。陽子ですが、数時間以内にアニールされ、再促進されました。完全なリソソーム機能には、システインカテプシンおよびその他の加水分解物の新しいタンパク質合成が必要でした。我々のデータは、リソソーム酵素の酵素がサイトゾルへの放出と、LLOME誘発アポトーシス中に提案されたタンパク質分解シグナル伝達に反対しています。

L-leucyl-L-leucine methyl ester (LLOMe) induces apoptosis, which is thought to be mediated by release of lysosomal cysteine cathepsins from permeabilized lysosomes into the cytosol. Here, we demonstrated in HeLa cells that apoptotic as well as sub-apoptotic concentrations of LLOMe caused rapid and complete lysosomal membrane permeabilization (LMP), as evidenced by loss of the proton gradient and release into the cytosol of internalized lysosomal markers below a relative molecular mass of 10,000. However, there was no evidence for the release of cysteine cathepsins B and L into the cytosol; rather they remained within lysosomes, where they were rapidly inactivated and degraded. LLOMe-induced adverse effects, including LMP, loss of cysteine cathepsin activity, caspase activation and cell death could be reduced by inhibition of cathepsin C, but not by inhibiting cathepsins B and L. When incubated with sub-apoptotic LLOMe concentrations, lysosomes transiently lost protons but annealed and re-acidified within hours. Full lysosomal function required new protein synthesis of cysteine cathepsins and other hydrolyses. Our data argue against the release of lysosomal enzymes into the cytosol and their proposed proteolytic signaling during LLOMe-induced apoptosis.