単一鎖のアデノ関連ウイルスは、マウスアイの前部への効率的な遺伝子移動を達成します

アデノ関連ウイルス（AAV）は、網膜遺伝子治療の遺伝子送達媒体として広く使用されていますが、治療の機会を解き放つために重要な目の前部を標的とする能力はあまり特徴づけられません。以前は、角膜と小柱骨折（TM）の形質導入には自己複製（SC）AAVが必要であることが示されていました。導入。ここでは、角膜内皮とTMを標的とするためのSCAAVの必要性を克服する能力について、単一の鎖（SS）ゲノム立体構造でいくつかのAAVキャップシドを評価しました。AAV2、8、およびANC80L65と呼ばれる最近合成されたAAVをin vitroおよびin vivoで評価しました。結果は、SCAAV2がヒトの骨列骨折（HTM）不死化細胞株を含むin vitroで優れた感染性を示したことを示しています。ANC80L65は、TM、角膜間質、および内皮細胞を含む、マウス前部のすべての成分を効率的に効率的に系統内注射に続いて導入しました。これらの結果は、ANC80L65がSCAAVゲノムがTMと角膜ターゲティングを可能にするための要件を克服し、眼の前部におけるAAV遺伝子転移の潜在的な実験的および治療的使用を拡大できることを示唆しています。

Adeno-associated viruses (AAVs) are used extensively as a gene delivery vehicle for retinal gene therapy, yet its ability to target the anterior segment of the eye, critical to unlocking therapeutic opportunities, is less characterized. Previously, self-complimentary (sc) AAV was shown to be necessary for transduction of the cornea and trabecular meshwork (TM), limiting the size of the gene transfer cassette, likely due to a block in second strand synthesis thought to be required for functional transduction. Here, we evaluated several AAV capsids in a single stranded (ss) genome conformation for their ability to overcome the need for scAAV for targeting corneal endothelium and TM. AAV2, 8, and a recently synthetically developed AAV called Anc80L65 were evaluated in vitro and in vivo by intracameral injection in mice. Results show that although scAAV2 demonstrated superior infectivity in vitro including Human Trabecular meshwork (HTM) immortalized cell lines; Anc80L65 transduced following a single intracameral injection efficiently all components of the mouse anterior segment, including the TM, corneal stroma, and endothelial cells. These results suggest that Anc80L65 is able to overcome the requirement for scAAV genomes to enable TM and corneal targeting, expanding the potential experimental and therapeutic use of AAV gene transfer in the anterior segment of the eye.