糖タンパク質Ib結合アッセイ（VWF：GPIB）によるフォンウィルブランド因子活性の実験室試験

Von Willebrand因子（VWF）抗原（VWF：AG）の評価に加えて、VON Willebrand疾患（VWD）の第一選択検査室調査には、VWFのGPIB（糖タンパク質IB）結合活性を測定するためのアッセイが含まれます。GPIB結合活性の低下は、ほとんどのVWDタイプで特徴的です。長年にわたり、GPIB結合活性を測定するために最も頻繁に使用されるアッセイは、リストセケチンの存在下でのVWFによる固定ヒト血小板の凝集を測定するRistocetin補因子アッセイ（VWF：RCO）でした。高いアッセイのばらつきやVWF感度の欠如を含むパフォーマンスの問題のため、このアッセイは現在、組換えGPIBへのVWFの結合に基づくアッセイによって現在置き換えられています。1つの公開された方法（現在はVWF：GPIBR：GPIBR）は、Ristocetinの存在下で結合反応をトリガーするために野生型GPIBを使用しています。もう1つのより広く使用されている方法（現在はVWF：GPIBMの略語）は、Ristocetinなしで機能獲得GPIBを使用します。これにより、VWFのGPIBへの自発的な結合が可能になり、非生理学的物質リストセチンに関連する問題が回避されます。VWFのGPIBへの結合は、ELISA、粒子凝集、または化学発光など、さまざまな原理を使用して定量化できます。次の章では、粒子の凝集に基づいたRistocetinを含まない方法について詳しく説明します。

In addition to assessment of von Willebrand factor (VWF) antigen (VWF:Ag), the first-line laboratory investigation of possible von Willebrand disease (VWD) often includes an assay to measure GPIb (glycoprotein Ib) binding activity of VWF. A decreased GPIb binding activity is characteristic for most of the VWD types. For many years, the most frequently used assay for measuring GPIb binding activity was the ristocetin cofactor assay (VWF:RCo), which measures the agglutination of fixed human platelets by VWF in the presence of ristocetin. Because of performance issues, including high assay variability and a lack of VWF sensitivity, this assay is currently being replaced or supplemented by assays based on the binding of VWF to recombinant GPIb. One published method (now abbreviated VWF:GPIbR) uses wild-type GPIb for triggering the binding reaction in the presence of ristocetin. Another more widely used method (now abbreviated VWF:GPIbM) uses gain-of-function GPIb without ristocetin; this permits spontaneous binding of VWF to GPIb and avoids problems associated with the nonphysiological substance ristocetin. The binding of VWF to GPIb can be quantified by using different principles, e.g., ELISA, particle agglutination, or chemiluminescence. The following chapter describes a ristocetin-free method based on particle agglutination in more detail.