原因不明の再発流産は、異常な精子プロタミンmRNA含有量に関連しています

研究の質問：精子の異常なプロタミン-1およびプロタミン-2 mRNAレベルに関連する原因不明の再発流産はありますか？ 概要回答：女性パートナーが2つ以上の連続した流産を経験した男性の男性のプロタミン-1およびプロタミン-2 mRNAレベル、および精子2 mRNA比の両方と同様に、プロタミン-1対プロタミン-2 mRNA比は、両方の健康なコントロール男性と比較して有意に異なりましたIVF/ICSIを受けているサブフェルタイルカップル。 すでに知られていること：異常な精子プロタミン比は、雄の因子不妊症に関連していることが知られています。この研究のデータは、プロタミンmRNA比が早期の胚の発達にさらに影響を与える可能性があることを示唆しています。 研究デザイン、サイズ、期間：研究集団は、2014年から2016年の間に再発妊娠損失の協議で2つ以上の連続した説明のつかない流産を女性パートナーが提示した男性から採用されました。症例およびコントロールからの精子は、プロタミン-1およびプロタミン-2の特定のプライマーペアを使用して、転写定量PCR（RTQPCR）を逆逆転写しました。 参加者/材料、設定、方法：妊娠20週の前に女性パートナーが少なくとも2回連続して特発性流産を経験した25人の男性の精液サンプルで、プロタミン-1およびプロタミン-2 mRNAレベルを分析しました。カップルは、ドイツのLMUミュンヘンの不妊センターでの協議中に、およびオーストリアのウィーン医科大学の婦人科内分泌学および生殖医学の臨床部門で募集されました。結果は、32人の健康なドナー（WHO、2010年）の泌尿器科、小児泌尿器科、アンドロロジー、ドイツ、ジーセン、およびLMUミュンヘンの不妊治療センターのIVF/ICSIプログラムに参加した107人の男性の結果を比較しました。、ドイツ。 主な結果と偶然の役割：プロタミン-1およびプロタミン-2 mRNAレベル、およびプロタミンmRNA比とすべての日常的な精液パラメーターは、再発流産カップルと健康なボランティアの間に有意差を明らかにしました（p <0.01）。再発流産カップルとIVF/ICSIを受けているカップルと比較すると、プロタミン-1およびプロタミン-2 mRNAのCT値が有意に高く、プロタミンmRNA比はRMカップルで有意に低かった（P <0.01）。プロタミンmRNAレベルとプロタミンmRNA比を日常的な精液パラメーターと比較すると、進行性運動性とプロタミン-2 mRNAレベル（p = 0.015）の間に、ならびに非進行性運動性とプロタミンmRNA比の間に有意な負の相関が明らかでした。（p = 0.023）。 慎重な制限の理由：データはRMの大きな異常を示していますが、結果を確認するにはより大きなサンプルサイズが必要になります。サンプルサイズが大きいほど、主にプロタミンmRNAレベルの中央値に焦点を合わせる必要があるという事実のバランスもとらえています。最後に、健康なコントロールグループの男性は、少なくとも古典的な精液パラメーターに関して、いくつかのバイアスを導入した可能性のあるケースグループの男性よりも年齢が若かった。さらに、タンパク質レベルの代わりにプロタミンmRNAのみを測定できます。 調査結果のより広い意味：正確なメカニズムは解明されていないが、我々のデータは、精子のプロタミンmRNAレベルが施肥を成功させるためだけでなく、初期胚の適切な発達にも重要であることを示唆している。 研究資金/競合する利息：大学クリニックGiessenおよびMarburg（UKGM 29/2015GI）からの付与。競合する関心はありません。 試用登録番号：n/a。

STUDY QUESTION: Are unexplained recurrent miscarriages associated with abnormal protamine-1 and protamine-2 mRNA levels in spermatozoa? SUMMARY ANSWER: Both protamine-1 and protamine-2 mRNA levels as well as the protamine-1 to protamine-2 mRNA ratio in spermatozoa from men whose female partners experienced two or more consecutive miscarriages were significantly different compared to those from both healthy control men and subfertile couples undergoing IVF/ICSI. WHAT IS KNOWN ALREADY: Aberrant sperm protamine ratios are known to be associated with male-factor infertility. Data from this study suggest that the protamine mRNA ratio may additionally affect early embryo development. STUDY DESIGN, SIZE, DURATION: The study population was recruited from men whose female partners presented with two or more consecutive unexplained miscarriages in a consultation for recurrent pregnancy loss between 2014 and 2016. At the research laboratory of the Urological Clinic of the University Giessen, spermatozoa from cases and controls were subjected to reverse transcription quantitative PCR (RTqPCR) using specific primer pairs for protamine-1 and protamine-2. PARTICIPANTS/MATERIALS, SETTING, METHODS: Protamine-1 and protamine-2 mRNA levels were analysed in semen samples from 25 men whose female partners experienced at least two consecutive idiopathic miscarriages before the 20th week of gestation. The couples were recruited during consultation at the Fertility Center of the LMU Munich, Germany, and at the Clinical Division of Gynecologic Endocrinology and Reproductive Medicine of the Medical University of Vienna, Austria. Results were compared with those from 32 healthy donors (WHO, 2010) recruited at the Department of Urology, Pediatric Urology and Andrology, Giessen, Germany, and 107 men whose partners participated in an IVF/ICSI program at the Fertility Center of the LMU Munich, Germany. MAIN RESULTS AND THE ROLE OF CHANCE: Protamine-1 and protamine-2 mRNA levels as well as the protamine mRNA ratio and all routine semen parameters revealed significant differences between recurrent miscarriage couples and healthy volunteers (P < 0.01). When comparing recurrent miscarriage couples with couples undergoing IVF/ICSI, Ct-values of protamine-1 and protamine-2 mRNAs were significantly higher and the protamine mRNA ratio was significantly lower in RM couples (P < 0.01). When comparing protamine mRNA levels and the protamine mRNA ratio with routine semen parameters, a significant negative correlation was evident between progressive motility and the protamine-2 mRNA level (P = 0.015), as well as between non-progressive motility and the protamine mRNA ratio (P = 0.023). LIMITATIONS REASONS FOR CAUTION: Although our data demonstrate significant abnormalities in RM, larger sample sizes will be needed to confirm our results. Larger sample sizes should also balance the fact that we had to focus mainly on median protamine mRNA levels. Finally, men in the healthy control group were younger in age than those in the case group, which might have introduced some bias, at least concerning the classic semen parameters. Moreover, only protamine mRNA instead of protein levels could be measured. WIDER IMPLICATIONS OF THE FINDINGS: Although the exact mechanism remains to be elucidated, our data suggest that protamine mRNA levels in spermatozoa are not only important for successful fertilization, but also for proper development of the early embryo. STUDY FUNDING/COMPETING INTEREST(S): Grant from the University Clinic Giessen and Marburg (UKGM 29/2015GI). There are no competing interests. TRIAL REGISTRATION NUMBER: N/A.