A20は、NF-κBP105前駆体の分解と限定処理の両方を阻害します：そのレギュレーターの役割への新しい追加層

P105は、NF-κBシグナル伝達でデュアル役割を果たします。アクティブサブユニットP50を生成し、前駆体型でNF-κBの活性化を阻害します。P105処理は基礎条件下で発生し、シグナル伝達後に増加します。IκBキナーゼβ（IKKβ）は、p105のC末端ドメインでリン酸化を媒介し、前駆体の加速処理と分解につながります。A20は、NF-κBシグナル伝達経路の折り畳みを伴う、脱ユビキチン化およびユビキチン結紮酵素です。ここでは、A20がP105のTNFα誘発性タンパク質分解を抑制することを示します。A20は、シグナル誘導処理とP105の上流のIKK刺激の分解の両方を阻害することを実証します。さらに、A20は、IKK独立の方法で前駆体タンパク質の構成的処理を抑制します。siRNAによる細胞内のA20のサイレンシングは、P105処理とP50の生成を回復します。A20の機能分析は、亜鉛フィンガードメイン（ZF）によって媒介されるユビキチンリガーゼ活性が、基底処理阻害効果に必要であることを示しています。ただし、そのN末端卵巣腫瘍（OTU）ドメインは義務的ではありません。A20は、その前駆体P105のユビキチン化を減らすことにより、細胞のP50生成を阻害することを示しています。共免疫沈降実験は、A20が最近同定されたリガーゼKPC1の存在下でのみP105によって免疫沈降されることを示しています。我々のデータは、P105ユビキチン化とその後の分解と限られた処理に影響を与えることにより、A20の既知のNF-κB阻害効果を説明するための追加の新しいメカニズムを提案します。

p105 plays dual roles in NF-κB signaling: it generates the active subunit p50 and in its precursor form inhibits NF-κB activation. p105 processing occurs under basal conditions and increases following signaling. IκB kinase β (IKKβ) mediates phosphorylation at the C-terminal domain of p105, leads to accelerated processing and degradation of the precursor. A20 is a dual function deubiquitinating and ubiquitin ligating enzyme, involving in turning-off the NF-κB signaling pathway. Here we show that A20 suppresses TNFα-induced proteolysis of p105. We demonstrate that A20 inhibits both the signal induced processing and the degradation of p105 upstream to IKK stimulation. In addition, A20 represses the constitutive processing of the precursor protein in IKK independent manner. Silencing of A20 in cells by siRNA, restores p105 processing and the generation of p50. Functional analysis of A20, shows that the ubiquitin ligase activity mediated by its zinc finger domain (ZF), is required for the basal processing inhibitory effect. Its N-terminal ovarian tumor (OTU) domain, however, is not obligatory. We show that A20 inhibits p50 generation in cells by reducing the ubiquitination of its precursor, p105. Co-immunoprecipitation experiments show that A20 is immunoprecipitated by p105 only in the presence of its recently identified ligase, KPC1. Our data propose an additional novel mechanism to explain the known NF-κB inhibitory effects of A20: by affecting p105 ubiquitination and subsequently its degradation and limited processing.