新規胎児のヒト網膜色素上皮（RPE）細胞株の自然発生は、食作用と形態形成に関する調査に利用できる

目的：原発性網膜色素上皮（RPE）細胞は、上皮の形態を再確立し、in vitroでネイティブRPE機能を維持する能力が限られており、市販のすべてのRPE細胞株には形態または機能の欠点があります。したがって、RPEの典型的な特性を備えた新しいRPE細胞株の確立は、生理学的および病理学的メカニズムをさらに理解するのに役立ちます。ここでは、まず13週間の中止胎児から自発的に生成されたRPEラインFHRPE-13Aを報告します。RPEモデルとしての可用性を調査することを目指しました。 材料と方法：RNA-seqデータは、ヒトゲノムアセンブリHG19にマッピングされました。グローバルな転写データは、加重遺伝子共発現ネットワーク分析（WGCNA）および差次的に発現した遺伝子（deg）によって分析されました。形態と分子の特性は、免疫蛍光、透過電子顕微鏡写真、PCR、およびウエスタンブロットによって調べられました。光受容体外部セグメント（POS）食作用アッセイとトランセピセリアル耐性測定（TER）をそれぞれ実施して、それぞれ貪食活性とバリア機能を評価しました。 結果：FHRPE-13A細胞は、RPEの典型的な多角形の形態と正常な生物学的プロセスを示しました。一方、それらはin vitroでPOS食作用が可能であり、TyrおよびTyrp1の発現レベルはARPE-19細胞の発現レベルよりも有意に高かった。 結論：胎児のヒトRPEラインFHRPE-13Aは、in vitroでのRPEの食作用と形態形成を研究するための貴重なシステムです。

OBJECTIVES: Primary retinal pigment epithelium (RPE) cells have a limited capacity to re-establish epithelial morphology and to maintain native RPE function in vitro, and all commercially available RPE cell lines have drawbacks of morphology or function; therefore, the establishment of new RPE cell lines with typical characteristics of RPE would be helpful in further understanding of their physiological and pathological mechanisms. Here, we firstly report a new spontaneously generated RPE line, fhRPE-13A, from a 13-week aborted foetus. We aimed to investigate its availability as a RPE model. MATERIALS AND METHODS: RNA-seq data were mapped to the human genome assembly hg19. Global transcriptional data were analysed by Weighted Gene Co-expression Network Analysis (WGCNA) and differentially expressed genes (DEGs). The morphology and molecular characteristics were examined by immunofluorescence, transmission electron micrographs, PCR and western blot. Photoreceptor outer segments (POS) phagocytosis assay and transepithelial resistance measurement (TER) were performed to assess phagocytic activity and barrier function, respectively. RESULTS: The fhRPE-13A cells showed typical polygonal morphology and normal biological processes of RPE. Meanwhile they were capable of POS phagocytosis in vitro, and the expression level of TYR and TYRP1 were significantly higher than that in ARPE-19 cells. CONCLUSIONS: The foetal human RPE line fhRPE-13A is a valuable system for researching phagocytosis and morphogenesis of RPE in vitro.