[コアグラーゼ陰性ブドウ球菌株のバイオフィルム形成に対するバンコマイシンとダプトマイシンのin vitro効果]

コアグラーゼ陰性ブドウ球菌（CNS）は、血流河川感染症（BSI）およびカテーテル関連の血流感染症（CR-BSI）のプライマー剤の1つであり、主に中央の静脈カテーテルの使用に関連し、罹患率と死亡率の重要な原因に関連しています。抗菌治療と支持治療の使用にもかかわらず。このような感染症の適切な治療を行うには、これらの原因となる微生物の特性を決定することが重要です。私たちの研究の目的は、血流（BSI）およびカテーテル関連の血流感染症（CR-BSI）の原因剤であるコアグラーゼ陰性ブドウ球菌（CNS）のバイオフィルム形成を評価し、浮遊性形態の最小阻害濃度（MIC）を決定することでした。バンコマイシンとダプトマイシンのSESSILE型の最小バイオフィルム根絶濃度（MBEC）、およびin vitroでのバイオフィルム形成分離株の感染におけるこれらの抗生物質の有効性を評価します。合計65号線（n = 26カテーテルコロニーザー、n = 28 cr-bsi、n = 11 bsiエージェント）が従来の方法で識別され、BDフェニックス（米国ベクトンディキンソン）およびブルーカーマイクロフレックスMS（ブルーカーダルトニクス、ドイツドイツ）システム。メチシリン抵抗性は、PCRを含むMECA遺伝子の存在によって決定されました。バンコマイシンとダプトマイシンのMIC値は、25および50μg/mL Ca ++を含むダプトマイシン培地について、スープ微量希釈により調査されました。バイオフィルム形成の評価とMBECの検出は、マイクロプレート法によって決定されました。クローン関係は、PFGEメソッドによって調査されました。合計65個の分離株。26人のカテーテルコロニーサイズ、28人のCr-BSI剤、および11人のBSI剤を評価し、表皮ブドウ球菌（n = 33）、haemolyticus（n = 16）、ブドウ球菌（n = 15）、およびブドウ球菌性腫腫（n = 1）と同定されました。。分離株の81.5％はメチシリン耐性であることがわかり、それらはすべて、バンコマイシン（MIC =0.125-4μg/mL）およびダプトマイシン（MIC =0.062-0.25μg/mL25μg/mL Ca ++およびおよびおよび25μg/mL Ca ++と敏感であることがわかりました。50μg/ml Ca ++を含む培地でMIC =0.031-0.50μg/mL）。ダプトマイシンの場合は、50μg/mL Ca ++を含む培地ではMIC値が低かった。ダプトマイシンの有効性はCa ++の生理学的レベルに依存していることが知られているため、これらの抗菌性の構造に立体配座の変化を引き起こします。また、私たちの発見は、ダプトマイシンの有効性を確保するために高レベルのCa ++が必要であることを示唆しました。すべての分離株は、陽性のさまざまな強度でバイオフィルムを生成しました（n = 12/18.5％弱い、n = 35/％53.8中程度、n = 18/％27.7強い）。バンコマイシンのMBECおよびMBEC/MIC値は、ダプトマイシンよりも高いことがわかりました（P <0.001）。強力なバイオフィルム生産者は、MBECおよびMBEC/MIC、MBEC50/MIC50 VE MBEC90/MIC90値が高かった（P <0.05）。特に、バイオフィルム形成分離株の感染症では、プランクトン細菌の感受性を反映するため、バイオフィルム関連の感染症の治療において、MIC値のみの検出は必ずしも十分ではありません。MICとMBECの値と我々の研究で見つかったMBEC/MICの高いレートの間の不一致は、この予測をサポートしました。バンコマイシンの同じ値と比較したDaptomycinのMBECおよびMBEC/MIC値の低い検出は、ダプトマイシンが効果的である可能性があることを示唆しました。バイオフィルム感染の治療におけるバンコマイシンよりも低用量。

Coagulase-negative staphylococci (CNS) are one of the primer agents of blood stream infections (BSI) and catheter-related bloodstream infections (CR-BSI) which are associated mostly with the usage of central venous catheters and, important causes of morbidity and mortality despite the usage of antibacterial and supportive treatment. It is important to determine the properties of these causative microorganisms in order to make appropriate treatment of such infections. The aims of our study were to evaluate the biofilm formation of coagulase negative staphylococci (CNS) which were causative agents of bloodstream (BSI) and catheter related bloodstream infections (CR-BSI), to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) of planktonic forms and minimal biofilm eradication concentration (MBEC) of sessile forms for vancomycin and daptomycin and to evaluate the efficacy of these antibiotics in infections with biofilm-forming isolates in vitro. A total of 65 CoNS (n= 26 catheter colonizers, n= 28 CR-BSI, n= 11 BSI agents) were identified by conventional methods and also with BD Phoenix (Becton Dickinson, USA) and Bruker Microflex MS (Bruker Daltonics, Germany) systems. Methicillin resistance was determined by the presence of mecA gene with PCR. MIC values of vancomycin and daptomycin were investigated by broth microdilution, for daptomycin medium containing 25 and 50 μg/ml Ca++ were used. Assessment of biofilm formation and detection of MBEC were determined by microplate method. The clonal relationship was investigated by the PFGE method. A total of 65 isolates; 26 catheter colonizers, 28 CR-BSI agents and 11 BSI agents were evaluated and identified as Staphylococcus epidermidis (n= 33), Staphylococcus haemolyticus (n= 16), Staphylococcus hominis (n= 15), and Staphylococcus capitis (n= 1). 81.5% of the isolates were found to be methicillin resistant and all of them were found to be sensitive to vancomycin (MIC= 0.125-4 μg/ml) and daptomycin (MIC= 0.062-0.25 μg/ml in 25 μg/ml Ca++ and MIC= 0.031-0.50 μg/ml in 50 μg/ml Ca++ containing medium). MIC values were lower in medium containing 50 μg/ml Ca++ for daptomycin. As it is known that the efficacy of daptomycin depends on the physiological levels of Ca++, which causes conformational changes in the structure of these antibacterials. Our findings also suggested that high levels of Ca++ are needed to ensure the efficacy of daptomycin. All of the isolates produced biofilm at different strengths of positivity (n= 12/18.5% weak, n= 35/%53.8 moderate, n= 18/%27.7 strong). MBEC and MBEC/MIC values for vancomycin were found to be higher than daptomycin (p< 0.001). Strong biofilm producers had higher MBEC and MBEC/MIC, MBEC50/MIC50 ve MBEC90/MIC90 values (p< 0.05). Especially in infections with biofilm forming isolates, the detection of only MIC values are not always sufficient in the treatment of biofilm-related infections as they reflect the sensitivity of planktonic bacteria. The inconsistency between the MIC and MBEC values and the high rates of MBEC/MIC found in our study supported this prediction.The lower detection of MBEC and MBEC/MIC values of daptomycin compared to the same values of vancomycin suggested that daptomycin might be effective at lower doses than vancomycin in the treatment of biofilm infections.