細胞内コンパートメント、密な体、ビリオンにおけるサイトメガロウイルスの主要なテグメントタンパク質PP65とプロテインキナーゼPUL97間の動的調節相互作用

ヒトサイトメガロウイルス（HCMV）は、かなりの臨床的重要性の遍在性の病原体です。ウイルス複製に重要なプロセスを理解することは、HCMV感染に対する治療戦略の開発に不可欠です。HCMVエンコードプロテインキナーゼPul97は、ウイルス複製の重要な多機能調節因子です。いくつかのウイルスタンパク質および細胞タンパク質は、PUL97によってリン酸化されています。リンタンパク質pp65は、Pul97の重要な基質の1つです。これは、HCMVビリオンの最も豊富なテグメントタンパク質であり、他のビリオン成分のアップロードを仲介し、粒子の完全性に貢献しています。さらに、宿主の自然免疫防御を妨げ、それにより効率的なウイルス複製を可能にします。さまざまなアプローチを適用することにより、さまざまなコンパートメントでPP65-PUL97相互作用を特徴付けました。具体的には、pp65のPul97相互作用ドメインが定義されました（282-415）。PUL97-PP65の相互作用を強化する推定サイクリンブリッジが特定されました。ビリオンおよび高密度の体の形態形成に対するPUL97変異の影響は、PUL97変異ウイルスを使用して対処されました。ウイルス粒子のプロテオームの変化が見られました。特に、PUL97の細胞質変異体を発現する変異体ウイルスが見られました。これらのデータに基づいて、PP65とPUL97の間のこれまでの認識されていない機能的関係を仮定し、PP65-PUL97相互作用の洗練されたモデルを提示します。

Human cytomegalovirus (HCMV) is a ubiquitous pathogen of considerable clinical importance. Understanding the processes that are important for viral replication is essential for the development of therapeutic strategies against HCMV infection. The HCMV-encoded protein kinase pUL97 is an important multifunctional regulator of viral replication. Several viral and cellular proteins are phosphorylated by pUL97. The phosphoprotein pp65 is one important substrate of pUL97. It is the most abundant tegument protein of HCMV virions, mediating the upload of other virion constituents and contributing to particle integrity. Further to that, it interferes with host innate immune defences, thereby enabling efficient viral replication. By applying different approaches, we characterized the pp65-pUL97 interaction in various compartments. Specifically, the pUL97 interaction domain of pp65 was defined (282-415). A putative cyclin bridge that enhances pUL97-pp65 interaction was identified. The impact of pUL97 mutation on virion and dense body morphogenesis was addressed using pUL97 mutant viruses. Alterations in the proteome of viral particles were seen, especially with mutant viruses expressing cytoplasmic variants of pUL97. On the basis of these data we postulate a so far poorly recognized functional relationship between pp65 and pUL97, and present a refined model of pp65-pUL97 interaction.