Hoechst 33342およびPyronin y染色による生細胞におけるG0のフローサイトメトリー検出

Hoechst 33342およびPyronin y二重染色を使用して、フローサイトメトリーにより生細胞のDNAおよびRNA含有量を測定できます。G0相の静止細胞は、G1相の細胞と同じ量のDNAを持っていますが、増殖細胞と比較してRNAレベルが低くなっています。したがって、G0相の静止細胞は、G1、S、およびG2 M相の増殖細胞と区別できます。この章では、Hoechst 33342およびPyronin Yを使用した生細胞の二重染色のプロトコルについて説明します。無傷および生細胞の免疫表現型Hoechst 33342およびPyronin Y染色は、定義された細胞集団からの静止細胞の分析と分離のための強力な非侵襲的方法です。。

Hoechst 33342 and Pyronin Y double staining can be used to measure DNA and RNA content in live cells by flow cytometry. Quiescent cells at G0 phase have the same amount of DNA as cells at G1 phase but lower RNA levels compared to proliferating cells. Therefore, resting cells in G0 phase can be distinguished from proliferating cells in G1, S, and G2 M phases. This chapter describes a protocol for double staining of live cells with Hoechst 33342 and Pyronin Y. Combined with immunophenotyping of intact and live cells Hoechst 33342 and Pyronin Y staining is a powerful noninvasive method for the analysis and isolation of quiescent cells from any defined cell population.