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FEMS microbiology letters2017Nov01Vol.364issue(20)

Yersinia Enterocolitica CSRAは、YSAおよびYSCタイプ3分泌システムの発現を独自の方法で調節します

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文献タイプ:
  • Journal Article
概要
Abstract

この研究では、炭素貯蔵レギュレーターA(CSRA)が、YSP(YERSINIA分泌タンパク質)とYOPS(Yersinia outerタンパク質)を制御するYSAおよびYSC 3型分泌(T3S)システム遺伝的調節カスケードの発現にそれぞれどのように影響するかを調査しました。ほとんどの場合、CSRAはLACZ転写融合を使用して監視できる活性であるmRNA安定性のメディエーターとして機能することを考えると、レポーター株のコレクションを採用してYSAおよびYSC遺伝子発現を評価しました。この目的のために、YSAまたはYSC T3Sシステムのいずれかを誘導するために細菌を栽培しました。CSRA変異体と野生型株との比較により、それぞれの誘導条件に応じて、YSAおよびYSC遺伝子カスケードにまたがる遺伝子が発現の増加を示すことが明らかになりました。次に、CSRAがYSPとYOPSの分泌に影響を与える可能性をテストし、野生型およびCSRA変異株による分泌タンパク質のプロファイルをプロテオーム解析によって比較しました。YSPは過剰に分泌され、YOPはCSRA変異体のために分泌されていませんでした。これらの結果は、CSRAがYersinia EnterocoliticaのYSAおよびYSC T3Sシステムの両方に影響するという仮説を支持しています。彼らはさらに、CSRAが地上と寄生虫の存在の間のライフサイクルシフト中に、この病原性細菌の適応を制御する上で重要な役割を果たしているという結論を支持しています。

この研究では、炭素貯蔵レギュレーターA(CSRA)が、YSP(YERSINIA分泌タンパク質)とYOPS(Yersinia outerタンパク質)を制御するYSAおよびYSC 3型分泌(T3S)システム遺伝的調節カスケードの発現にそれぞれどのように影響するかを調査しました。ほとんどの場合、CSRAはLACZ転写融合を使用して監視できる活性であるmRNA安定性のメディエーターとして機能することを考えると、レポーター株のコレクションを採用してYSAおよびYSC遺伝子発現を評価しました。この目的のために、YSAまたはYSC T3Sシステムのいずれかを誘導するために細菌を栽培しました。CSRA変異体と野生型株との比較により、それぞれの誘導条件に応じて、YSAおよびYSC遺伝子カスケードにまたがる遺伝子が発現の増加を示すことが明らかになりました。次に、CSRAがYSPとYOPSの分泌に影響を与える可能性をテストし、野生型およびCSRA変異株による分泌タンパク質のプロファイルをプロテオーム解析によって比較しました。YSPは過剰に分泌され、YOPはCSRA変異体のために分泌されていませんでした。これらの結果は、CSRAがYersinia EnterocoliticaのYSAおよびYSC T3Sシステムの両方に影響するという仮説を支持しています。彼らはさらに、CSRAが地上と寄生虫の存在の間のライフサイクルシフト中に、この病原性細菌の適応を制御する上で重要な役割を果たしているという結論を支持しています。

This study investigated how carbon storage regulator A (CsrA) affects expression of the Ysa and Ysc type 3 secretion (T3S) system genetic regulatory cascades that control Ysps (Yersinia secreted proteins) and Yops (Yersinia outer proteins) export, respectively. Given that most often CsrA acts as a mediator of mRNA stability, an activity that can be monitored using lacZ transcriptional fusions, we employed a collection of reporter strains to assess Ysa and Ysc gene expression. To this end, bacteria were cultivated to induce either the Ysa or the Ysc T3S system. Comparison of csrA mutants to the wild-type strain revealed that, in response to the respective inducing conditions, genes spanning the Ysa and Ysc gene cascades displayed increased expressions. Then, the possibility that CsrA affects secretion of Ysps and Yops was tested and the profiles of secreted proteins by wild-type and csrA mutant strains were compared by proteomic analysis. Ysps were over-secreted and Yops were under-secreted, for the csrA mutant. These results support the hypothesis that CsrA affects both the Ysa and Ysc T3S systems in Yersinia enterocolitica. They further support the conclusion that CsrA plays an important role in controlling adaptation of this pathogenic bacterium during its lifecycle shift between a terrestrial and parasitic existence.

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