細胞壁で処理された乳酸腫乳頭は、内部リボソーム侵入部位に組み込まれたラクトコッカルビシストロニックベクターのプラスミド移動効率をDF1細胞に増加させます

この研究は、内部リボソーム侵入部位に組み込まれたラクトコッカカルビシストロニックベクターPNZを抱えるラクトコッカス乳酸の細胞壁処理：bactofectionを介して真核細胞株、DF1細胞への遺伝子の送達を媒介することを示しています。Bactofection分析により、L。lactisのPNZ：VIGプラスミドをDF1細胞に転写し、プラスミドにクローン化されたVP2およびGFP遺伝子の両方が転写および翻訳できることが示されました。VP2タンパク質（49 kDa）のMRに対するタンパク質帯域は、ウエスタンブロット分析によって成功裏に検出されましたが、緑色蛍光は蛍光顕微鏡を使用して正常に検出されました。検出されたバンドの強度は、グリシン単独および治療なしでグリシン単独で処理したL. lactisと比較した場合、1.5％（w/v）グリシンと10μg/mlのリゾチームの両方で処理されたサンプルで増加しました。グリシンとリゾチームの両方の組み合わせでL. lactisの細胞壁処理は、プラスミド移動をDF1細胞に媒介するだけでなく、プラスミド移動効率を高めることも示されました。

This study demonstrates that cell wall treatment of Lactococcus lactis harbouring the internal ribosome entry site-incorporated lactococcal bicistronic vector pNZ:VIG mediated the delivery of genes into an eukaryotic cell line, DF1 cells, through bactofection. Bactofection analysis showed that the pNZ:VIG plasmid in L. lactis can be transferred into DF1 cells and that both the VP2 and gfp genes cloned in the plasmid can be transcribed and translated. The protein band relative to the Mr of VP2 protein (49 kDa) was successfully detected via Western blot analysis, while green fluorescence was successfully detected using a fluorescence microscope. The intensity of the bands detected increased for samples treated with both 1.5% (w/v) glycine and 10 μg/mL of lysozyme when compared to L. lactis treated with glycine alone and without treatment. Cell wall treatment of L. lactis with a combination of both glycine and lysozyme was not only shown to mediate plasmid transfer to DF1 cells, but also to increase the plasmid transfer efficiency.