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Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)20180101Vol.1678issue()

リアルタイムの変形性サイトメトリー:細胞のラベルフリー機能特性化

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

リアルタイムの変形性サイトメトリー(RT-DC)は、収縮したチャネルで最大1000細胞の形態とレオロジーをキャプチャおよび評価できるマイクロ流体技術です。細胞は、流体力学的力によって機械的接触なしに変形し、追加の取り扱いや染色手順を必要とせずにリアルタイムで定量化されます。細胞のセグメント化された写真は保存されており、さらなる分析に使用できます。RT-DCは、細胞骨格の変化に敏感です。これにより、たとえば、細胞周期段階の違いを示し、全血の異なる亜集団を特定し、休眠状態に入る細胞の機械的硬化を研究できます。取得可能なパラメーターの豊富さと機械的読み取りとしての解釈は、標準化が必要な分析的課題です。ここでは、RT-DCデータの測定と後処理のガイドラインを提供します。

リアルタイムの変形性サイトメトリー(RT-DC)は、収縮したチャネルで最大1000細胞の形態とレオロジーをキャプチャおよび評価できるマイクロ流体技術です。細胞は、流体力学的力によって機械的接触なしに変形し、追加の取り扱いや染色手順を必要とせずにリアルタイムで定量化されます。細胞のセグメント化された写真は保存されており、さらなる分析に使用できます。RT-DCは、細胞骨格の変化に敏感です。これにより、たとえば、細胞周期段階の違いを示し、全血の異なる亜集団を特定し、休眠状態に入る細胞の機械的硬化を研究できます。取得可能なパラメーターの豊富さと機械的読み取りとしての解釈は、標準化が必要な分析的課題です。ここでは、RT-DCデータの測定と後処理のガイドラインを提供します。

Real-time deformability cytometry (RT-DC) is a microfluidic technique that allows to capture and evaluate morphology and rheology of up to 1000 cells/s in a constricted channel. The cells are deformed without mechanical contact by hydrodynamic forces and are quantified in real-time without the need of additional handling or staining procedures. Segmented pictures of the cells are stored and can be used for further analysis. RT-DC is sensitive to alterations of the cytoskeleton, which allows, e.g., to show differences in cell cycle phases, identify different subpopulations in whole blood and to study mechanical stiffening of cells entering a dormant state. The abundance of the obtainable parameters and the interpretation as mechanical readout is an analytical challenge that needs standardization. Here, we will provide guidelines for measuring and post-processing of RT-DC data.

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