アフリカツメガエルのオタサドポールと成体カエル腹膜白血球の誘発

アフリカツメガエルのオタマジャクシと成体カエルの腹膜洗浄は、居住者および/または募集された自然免疫集団を隔離する信頼できる方法です。このプロトコルは、オタマジャクシと成体の両生類（Xenopus laevis）腹膜白血球の分離を詳述しています。孤立した細胞は、主に自然免疫集団で構成され、主に単核および多核肉植物の顆粒球で構成されています。ここで説明したように、これらの細胞は通常、熱で覆われた大腸菌を伴う動物の腹膜注射によって誘発され、炎症性細胞集団の腹膜蓄積を引き起こし、それが洗浄によって刺激された動物から分離されます。大腸菌媒介オタマジャクシと成体腹膜白血球の誘発は、炎症性の活性化を犠牲にして、回収された細胞の総数を大幅に促進します。逆に、ナイーブで刺激されていない動物で洗浄を行うことができ、非活性化細胞をはるかに低い収量で分離します。このプロトコルは、オタマジャクシと成体のカエルの自然免疫細胞集団を導出する信頼できる手段を表しており、刺激の条件を修正して、特定の実験設計の詳細に合わせて修正される場合があります。

Peritoneal lavage of Xenopus laevis tadpoles and adult frogs is a reliable way of isolating resident and/or recruited innate immune populations. This protocol details the isolation of tadpole and adult amphibian (Xenopus laevis) peritoneal leukocytes. The isolated cells are comprised predominantly of innate immune populations and chiefly of mononuclear and polymorphonuclear granulocytes. As described here, these cells are typically elicited by peritoneal injections of animals with heat-killed Escherichia coli, causing peritoneal accumulation of inflammatory cell populations, which are then isolated from the stimulated animals by lavage. E. coli-mediated elicitation of tadpole and adult peritoneal leukocytes greatly enhances the total numbers of recovered cells, at the cost of their inflammatory activation. Conversely, lavage may be performed on naïve, unstimulated animals to isolate nonactivated cells with much lower yield. This protocol represents a reliable means of deriving tadpole and adult frog innate immune cell populations, and the conditions of the stimulation may be amended to suit the specifics of a given experimental design.