組織マイクロアレイのエピトープ保存方法：縦方向の前向き研究

目的：プレカットスライドの免疫反応性を維持するための最近のガイドライン、免疫反応性の喪失を定量化し、保存条件を変更することにより保存の可能性を判断しようとしました。 方法：組織マイクロアレイからのプラススライドは、室温、4°C、または-20°C、または室温、-20°C、-80°C、またはパラフィンコーティングの真空密閉容器での周囲空気にさらされたいくつかの条件のいずれかの下に保存されました。1年にわたる複数の間隔で、スライドをp53、イソクエン酸デヒドロゲナーゼ1、Ki-67、シナプトフィシン、およびアンドロゲン受容体に対する抗体で染色し、評価しました。 結果：時間0と比較して、全体的な中央値免疫反応性は6ヶ月で66％、1年で51％でした。実験中、これはパラフィンコーティングに保存されたプレカットスライドで55％、-20°Cで保存されたもので最大87％でした。真空シーリングは、一部の抗体標的にとって効果的な防腐剤であり、他の抗体標的にとっては有害でした。-80°Cでの保管には付加価値がありませんでした。 結論：プレカットスライドには、予後、予測、診断マーカーの分析を損なう可能性のある免疫反応性の時間、貯蔵条件、抗体依存性喪失があります。私たちの調査結果は、以前の推奨事項を裏付けており、パラフィンコーティングや真空シーリングなしで、最良の保管条件が-20°Cであることを示唆しています。

OBJECTIVES: We sought to test recent guidelines for preserving immunoreactivity of precut slides, to quantify loss of immunoreactivity, and to determine potential for preservation by altering storage conditions. METHODS: Precut slides from tissue microarrays were stored under one of several conditions: exposed to ambient air at room temperature, 4°C, or -20°C or in a vacuum-sealed container at room temperature, -20°C, -80°C, or with paraffin coating. At multiple intervals over 1 year, slides were stained with antibodies against p53, isocitrate dehydrogenase 1, Ki-67, synaptophysin, and androgen receptor and evaluated. RESULTS: Compared with time 0, the overall median percentage immunoreactivity was 66% at 6 months and 51% at 1 year. During the experiment, this was as low as 55% for precut slides stored in paraffin coating and up to 87% for those stored at -20°C. Vacuum sealing was an effective preservative for some antibody targets and detrimental for others. Storage at -80°C did not have added value. CONCLUSIONS: For precut slides, there is a time, storage condition, and antibody-dependent loss of immunoreactivity that could compromise analysis of prognostic, predictive, and diagnostic markers. Our findings support previous recommendations and suggest that the best storage conditions are at -20°C, without paraffin coating or vacuum sealing.