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ナチュラルキラー（NK）リンパ球ADCCは、抗ウイルス保護とモノクローナル抗体（mAb）抗腫瘍療法をサポートしています。さまざまな個人の生体内ADCC治療反応を予測するには、臨床的に入手可能な量の血液を使用して、ADCC細胞溶解能と「標的」細胞上の抗体のNK細胞受容体認識の両方の測定が必要です。20 mlの血液は、ここで説明する溶解能の新しいアッセイと、FC受容体認識のための抗体EC50アッセイのために、十分な末梢血単核細胞（PBMC）を提供します。溶解能力アッセイでは、フローサイトメトリーを使用して、PBMCからCD16A IgG fc受容体陽性Nkエフェクター細胞を定量化して、分離中のNKの喪失を避けました。ターゲットは、過剰なオビヌツズマブ2型抗CD20 mAbで前処理した51cr標識ダウディB細胞で、洗浄されました。残りの遊離mAbは、PBMCのB細胞を「ターゲット」に変換するには不十分でした。計算しました：DaudisがDaudisに対するCD16A陽性NK細胞の1：1の比率で殺された割合（CX1：1）。溶解斜面;およびADCC50溶解ユニット。27人のドナーのうち、CX1：1（16-73％のターゲットが殺された）および溶解斜面で広い範囲を検出しました。勾配のバリエーションにより、溶解ユニットの適用が妨げられました。個人のADCC容量を比較するには、CX1：1をお勧めします。CX1：1は、精製されたNK細胞に対してPBMCと類似しており、CD16A V＆F遺伝子型および抗体EC50とは無関係でした。ターゲットに高いmAbが結合し、CD16AのオビヌツズマブFCの高い親和性により、CX1：1測定では、抗体認識ではなくADCC溶解能力を識別します。このアッセイにより、ADCCはNK細胞の分離なしで定量化でき、溶解ユニットに関連する歪みを回避できます。
ナチュラルキラー（NK）リンパ球ADCCは、抗ウイルス保護とモノクローナル抗体（mAb）抗腫瘍療法をサポートしています。さまざまな個人の生体内ADCC治療反応を予測するには、臨床的に入手可能な量の血液を使用して、ADCC細胞溶解能と「標的」細胞上の抗体のNK細胞受容体認識の両方の測定が必要です。20 mlの血液は、ここで説明する溶解能の新しいアッセイと、FC受容体認識のための抗体EC50アッセイのために、十分な末梢血単核細胞（PBMC）を提供します。溶解能力アッセイでは、フローサイトメトリーを使用して、PBMCからCD16A IgG fc受容体陽性Nkエフェクター細胞を定量化して、分離中のNKの喪失を避けました。ターゲットは、過剰なオビヌツズマブ2型抗CD20 mAbで前処理した51cr標識ダウディB細胞で、洗浄されました。残りの遊離mAbは、PBMCのB細胞を「ターゲット」に変換するには不十分でした。計算しました：DaudisがDaudisに対するCD16A陽性NK細胞の1：1の比率で殺された割合（CX1：1）。溶解斜面;およびADCC50溶解ユニット。27人のドナーのうち、CX1：1（16-73％のターゲットが殺された）および溶解斜面で広い範囲を検出しました。勾配のバリエーションにより、溶解ユニットの適用が妨げられました。個人のADCC容量を比較するには、CX1：1をお勧めします。CX1：1は、精製されたNK細胞に対してPBMCと類似しており、CD16A V＆F遺伝子型および抗体EC50とは無関係でした。ターゲットに高いmAbが結合し、CD16AのオビヌツズマブFCの高い親和性により、CX1：1測定では、抗体認識ではなくADCC溶解能力を識別します。このアッセイにより、ADCCはNK細胞の分離なしで定量化でき、溶解ユニットに関連する歪みを回避できます。
Natural killer (NK) lymphocyte ADCC supports anti-viral protection and monoclonal antibody (mAb) anti-tumor therapies. To predict in vivo ADCC therapeutic responses of different individuals, measurement of both ADCC cellular lytic capacity and their NK cellular receptor recognition of antibodies on 'target' cells are needed, using clinically available amounts of blood. Twenty ml of blood provides sufficient peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) for the new assay for lytic capacity described here and for an antibody EC50 assay for Fc-receptor recognition. For the lytic capacity assay, we employed flow cytometry to quantify the CD16A IgG Fc-receptor positive NK effector cells from PBMCs to avoid loss of NKs during isolation. Targets were 51Cr-labeled Daudi B cells pretreated with excess obinutuzumab type 2 anti-CD20 mAb and washed; remaining free mAb was insufficient to convert B cells in the PBMCs into 'targets'. We calculated: the percentage Daudis killed at a 1:1 ratio of CD16A-positive NK cells to Daudis (CX1:1); lytic slopes; and ADCC50 lytic units. Among 27 donors, we detected wide ranges in CX1:1 (16-73% targets killed) and in lytic slopes. Slope variations prevented application of lytic units. We recommend CX1:1 to compare individuals' ADCC capacity. CX1:1 was similar for purified NK cells vs. PBMCs and independent of CD16A V & F genotypes and antibody EC50s. With high mAb bound onto targets and the high affinity of obinutuzumab Fc for CD16A, CX1:1 measurements discern ADCC lytic capacity rather than antibody recognition. This assay allows ADCC to be quantified without NK cell isolation and avoids distortion associated with lytic units.
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