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Analytica chimica acta2017Dec01Vol.995issue()

ヒト血清中の鉄/トランスフェリン種分化の生物医学的調査のための測光流分析システム

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文献タイプ:
  • Journal Article
概要
Abstract

臨床鉄パラメーターの推定のためのマルチミューティングフロー分析(MCFA)システム:血清鉄(SI)、不飽和鉄結合能力(UIBC)、および総鉄結合能力(TIBC)が提案されています。発色した鉄の単純な測光検出に基づいた開発されたMCFAシステム(フェロジン)による鉄の単純な測光検出により、ヒト血清中のトランスフェリン(遊離およびFe結合タンパク質の測定)の種分化が可能になります。マニホールドの構築は、変化する条件下での測定の要件に適合しました。研究の過程で、SIおよびUIBCの測定に対するタンパク質の異なる効果が証明されています。これが、2種類のキャリブレーション方法を実行する理由でした。Si/ホロ輸送ファーリン測定の酸性培地での測定については、それぞれ3.4μmolL-1および9.1μmolL-1のレベルでの測定の制限と定量の制限によって特徴付けられ、キャリブレーション曲線法を適用しました。pH 7.4の生理学的媒体におけるUIBCパラメーター(アポトランスフェリンレベルに関連)の決定方法により、分析シグナルの取得にタンパク質が強い影響を与えるため、標準添加方法の使用が強制されました。提示されたシステムで実行されたこれら2つの異なる方法論は、ヒト血清サンプルの3つの臨床鉄/トランスフェリンパラメーターすべての推定を可能にしました。総トランスフェリンレベルに対応するTIBCは、SIとUIBCの合計として計算されました。

臨床鉄パラメーターの推定のためのマルチミューティングフロー分析(MCFA)システム:血清鉄(SI)、不飽和鉄結合能力(UIBC)、および総鉄結合能力(TIBC)が提案されています。発色した鉄の単純な測光検出に基づいた開発されたMCFAシステム(フェロジン)による鉄の単純な測光検出により、ヒト血清中のトランスフェリン(遊離およびFe結合タンパク質の測定)の種分化が可能になります。マニホールドの構築は、変化する条件下での測定の要件に適合しました。研究の過程で、SIおよびUIBCの測定に対するタンパク質の異なる効果が証明されています。これが、2種類のキャリブレーション方法を実行する理由でした。Si/ホロ輸送ファーリン測定の酸性培地での測定については、それぞれ3.4μmolL-1および9.1μmolL-1のレベルでの測定の制限と定量の制限によって特徴付けられ、キャリブレーション曲線法を適用しました。pH 7.4の生理学的媒体におけるUIBCパラメーター(アポトランスフェリンレベルに関連)の決定方法により、分析シグナルの取得にタンパク質が強い影響を与えるため、標準添加方法の使用が強制されました。提示されたシステムで実行されたこれら2つの異なる方法論は、ヒト血清サンプルの3つの臨床鉄/トランスフェリンパラメーターすべての推定を可能にしました。総トランスフェリンレベルに対応するTIBCは、SIとUIBCの合計として計算されました。

The Multicommutated Flow Analysis (MCFA) system for the estimation of clinical iron parameters: Serum Iron (SI), Unsaturated Iron Binding Capacity (UIBC) and Total Iron Binding Capacity (TIBC) has been proposed. The developed MCFA system based on simple photometric detection of iron with chromogenic agent (ferrozine) enables a speciation of transferrin (determination of free and Fe-bound protein) in human serum. The construction of manifold was adapted to the requirements of measurements under changing conditions. In the course of studies, a different effect of proteins on SI and UIBC determination has been proven. That was in turn the reason to perform two kinds of calibration methods. For measurements in acidic medium for SI/holotransferrin determination, the calibration curve method was applied, characterized by limit of determination and limit of quantitation on the level of 3.4 μmol L-1 and 9.1 μmol L-1, respectively. The determination method for UIBC parameter (related to apotransferrin level) in physiological medium of pH 7.4 forced the use of standard addition method due to the strong influence of proteins on obtaining analytical signals. These two different methodologies, performed in the presented system, enabled the estimation of all three clinical iron/transferrin parameters in human serum samples. TIBC corresponding to total transferrin level was calculated as a sum of SI and UIBC.

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