ヒトp53のC末端領域は、タンパク質のテトラマー化を調節することにより、水牛P53 N末端プロモーターのN末端特異的トランス活性化を減衰させます

ここでは、p53 null H1299肺癌細胞で研究しました。これは、バッファローP53（B-P53）に及ぼすヒトp53（H-P53）の支配的な陰性効果を誘導しました。最近、バッファローP53の全長cDNAを分離してクローン化しました。水牛とヒトP53タンパク質は、高度な構造的および機能的類似性を示します。一時的にトランスフェクトされたH1299細胞株B-P53は、H-P53と比較してMDM2を介した分解に対してより敏感であるように見えましたが、P21プロモーターをトランス活動する能力は人間の対応者よりも強かった。B-P53のこのより高いトランス活性化能力は、B-P53のP21プロモーターのトランス活性化に対するH-P53の支配的な陰性効果を示唆していることで失われました。ヒトとバッファローP53の両方のタンパク質は、ヘテロオリゴマー化する可能性がありますが、B-P53はH-P53よりもはるかに速くテトラメル化することができました。ヒトp53のキメラcDNA構築物が作成され、1-260 bp n末端がバッファローP53の対応物に置き換えられ、H1299細胞株で発現されました。キメラP53タンパク質の四量体化能力は、H-P53の四量体能力に匹敵しました。より強いP21トランス活性化とMDM2媒介分解に対する超感受性のようなB-P53の特性は、キメラタンパク質には不足していました。したがって、四量体P53のテトラマ化のより速い能力とより高いトランス活性化特性は、高分子相互作用を介したNおよびC末端ドメインの相互作用によって決定されることが示唆されています。

Here, we have studied in p53 null H1299 lung carcinoma cells, the dominant-negative effect of human p53 (h-p53) on buffalo p53 (b-p53) induced nuclear transactivation-dependent function. Recently, we have isolated and cloned the full-length cDNA of buffalo p53. Buffalo and human p53 proteins exhibit a high degree of structural and functional similarities. In transiently transfected H1299 cell line b-p53 appeared to be more sensitive to Mdm2-mediated degradation as compared to h-p53, although its ability to transactivate p21 promoter was stronger than that of the human counterpart. This higher transactivation ability of b-p53 was lost in the presence of h-p53 suggesting, a dominant-negative effect of h-p53 on b-p53's transactivation of p21 promoter. Both human and buffalo p53 proteins could hetero-oligomerize but the b-p53 could tetramerize much faster than the h-p53. A chimeric cDNA construct of human p53 was made where the 1-260 bp N-terminus was replaced with buffalo p53 counterpart and expressed in H1299 cell line. The tetramerization ability of the chimeric p53 protein was comparable to that of h-p53. Properties of b-p53 like stronger p21 transactivation and super sensitivity to Mdm2 mediated degradation were lacking in the chimeric protein. Thus, it is suggested that faster ability of tetramerization as well as higher transactivation property of buffalo p53 is determined by the interplay of N- and C-terminal domains through macromolecular interactions.