Loading...
Clinical infectious diseases : an official publication of the Infectious Diseases Society of America2018Apr17Vol.66issue(9)

エキノコッカス顆粒膜からの合成抗原Bサブユニットの構造的および免疫診断特性と、嚢胞生存率評価の標的抗原としての評価としての評価

,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

背景:嚢胞性エキノ炎症(CE)の血清症のためにいくつかのツールが提案されていますが、嚢胞の生存率評価に有望なものはありません。段階特有の診断値を持つ抗原が報告されていますが、よく特徴付けられた抗原とヒト血清サンプルを伴う研究はほとんどありません。抗原B(AGB)プロテオフォームは、段階に関連する発現と免疫反応性が異なるため、生存率のマーカーとして有望です。 方法:4つのAGBサブユニット(AGB1、AGB2、AGB3、AGB4)が合成され、構造的に特徴付けられました。西部の免疫ブロッティングおよび酵素結合免疫吸着アッセイ(ELISA)によるサブユニットの予備評価に基づいて、AGB1とAGB2は2つのELISAセットアップでさらにテストされ、422のヒト血清サンプルで広く検証されました。 結果:すべてのサブユニットは、高度な自発性オリゴマー化を示しました。オリゴマー内の相互作用する残基が同定され、各サブユニットのN末端とC末端の両方がホモオリゴマー接触界面に関与していることを示しています。ヘテロオリゴマーは特定されていません。AGB1とAgb2 ELISAは、嚢胞段階と比較して異なる感受性を明らかにしました。注目すべきは、高い特異性(97.2%)に加えて、AGB1は活動的移動嚢胞の感度が高いことを明らかにしました(CE1では100%、CE2では77.8%、CE3Aで81.5%、CE3Bで86.3%が不活性Cysts(41.7%)CE4およびCE5の場合は11.1%)および術後患者(44%)。興味深いことに、5年以上前にアルベンダゾールで治療された自発的に不活性嚢胞と6人中6人の患者のうち19人がAGB1アッセイで陰性でした。 結論:サブユニットの構造的特性評価は、合成抗原構造に関する洞察を提供します。合成AGB1の段階関連性の感度は、マルチアンティゲン環境の一部として有望であり、嚢胞生存率のマーカーとしてさらに縦断的評価に値します。

背景:嚢胞性エキノ炎症(CE)の血清症のためにいくつかのツールが提案されていますが、嚢胞の生存率評価に有望なものはありません。段階特有の診断値を持つ抗原が報告されていますが、よく特徴付けられた抗原とヒト血清サンプルを伴う研究はほとんどありません。抗原B(AGB)プロテオフォームは、段階に関連する発現と免疫反応性が異なるため、生存率のマーカーとして有望です。 方法:4つのAGBサブユニット(AGB1、AGB2、AGB3、AGB4)が合成され、構造的に特徴付けられました。西部の免疫ブロッティングおよび酵素結合免疫吸着アッセイ(ELISA)によるサブユニットの予備評価に基づいて、AGB1とAGB2は2つのELISAセットアップでさらにテストされ、422のヒト血清サンプルで広く検証されました。 結果:すべてのサブユニットは、高度な自発性オリゴマー化を示しました。オリゴマー内の相互作用する残基が同定され、各サブユニットのN末端とC末端の両方がホモオリゴマー接触界面に関与していることを示しています。ヘテロオリゴマーは特定されていません。AGB1とAgb2 ELISAは、嚢胞段階と比較して異なる感受性を明らかにしました。注目すべきは、高い特異性(97.2%)に加えて、AGB1は活動的移動嚢胞の感度が高いことを明らかにしました(CE1では100%、CE2では77.8%、CE3Aで81.5%、CE3Bで86.3%が不活性Cysts(41.7%)CE4およびCE5の場合は11.1%)および術後患者(44%)。興味深いことに、5年以上前にアルベンダゾールで治療された自発的に不活性嚢胞と6人中6人の患者のうち19人がAGB1アッセイで陰性でした。 結論:サブユニットの構造的特性評価は、合成抗原構造に関する洞察を提供します。合成AGB1の段階関連性の感度は、マルチアンティゲン環境の一部として有望であり、嚢胞生存率のマーカーとしてさらに縦断的評価に値します。

BACKGROUND: Several tools have been proposed for serodiagnosis of cystic echinococcosis (CE), but none seems promising for cyst viability assessment. Antigens with stage-specific diagnostic value have been described, but few studies with well-characterized antigens and human serum samples have been performed. Antigen B (AgB) proteoforms hold promise as markers of viability, due to their differential stage-related expression and immunoreactivity. METHODS: Four AgB subunits (AgB1, AgB2, AgB3, AgB4) were synthesized and structurally characterized. Based on the preliminary evaluation of the subunits by western immunoblotting and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), AgB1 and AgB2 were further tested in two ELISA setups and extensively validated on 422 human serum samples. RESULTS: All subunits showed a high degree of spontaneous oligomerization. Interacting residues within oligomers were identified, showing that both the N-terminal and C-terminal of each subunit are involved in homo-oligomer contact interfaces. No hetero-oligomer was identified. AgB1 and AgB2 ELISAs revealed different sensitivities relative to cyst stage. Of note, besides high specificity (97.2%), AgB1 revealed a higher sensitivity for active-transitional cysts (100% for CE1, 77.8% for CE2, 81.5% for CE3a, and 86.3% for CE3b) than for inactive cysts (41.7% for CE4 and 11.1% for CE5) and postsurgical patients (44%). Interestingly, 19 of 20 patients with spontaneously inactive cysts and 6 of 9 treated with albendazole >5 years earlier were negative on the AgB1 assay. CONCLUSIONS: The structural characterization of subunits provides insights into the synthetic antigen conformation. The stage-related sensitivity of synthetic AgB1 holds promise as part of a multiantigen setting and deserves further longitudinal evaluation as marker of cyst viability.

医師のための臨床サポートサービス

ヒポクラ x マイナビのご紹介

無料会員登録していただくと、さらに便利で効率的な検索が可能になります。

Translated by Google