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台湾の不規則な食習慣とライフスタイルのため、結腸直腸癌の発生率と死亡率は急速に増加しています。この研究では、水没した発酵から得られたイノトゥス斜角抽出物によるヒト結腸直腸癌HCT-116細胞の増殖に対する阻害活性を調査しました。細胞生存率はMTTの減少によって測定され、細胞膜の完全性は乳酸デヒドロゲナーゼ（LDH）放出によって決定されました。アポトーシス促進および抗アポトーシスメディエーターのmRNA発現は、リアルタイムPCRによってアッセイされ、P53およびNF-κBP65のレベルをウエスタンブロット分析を使用して評価しました。さらに、HCT-116細胞に対するI. obliquus抽出物の影響は、カスパーゼ-3活性によって評価されました。結果は、ミトコンドリアのアポトーシス経路の場合、定量的RT-PCRデータがアポトーシス促進遺伝子（BAX、BAD、およびカスパーゼ-3）のアップレギュレーションを示し、I。によるBAX/Bcl-2比の増加として要約することができます。さらに、20 mg/ml I.で処理すると、斜め抽出物は、HCT-116細胞でカスパーゼ-3活性を増強します。細胞周期G0/G1相停止の誘導：I。斜めは、アポトーシス遺伝子（p53、p21WAF1/CIP1）のmRNA発現を上方制御し、抗アポトーシス遺伝子（Cyclind1）を下方制御し、I. obliquus菌菌の抽出はHCT-116細胞におけるP53タンパク質の表現を増加させました。I.斜め抽出物は、HCT-116細胞におけるNF-κBP65タンパク質とCOX-2遺伝子の発現を減少させました。I. obliquus抽出物は、結腸直腸癌の治療を改善するために、ヘルスケアのための潜在的に新しい食品材料として使用できます。
台湾の不規則な食習慣とライフスタイルのため、結腸直腸癌の発生率と死亡率は急速に増加しています。この研究では、水没した発酵から得られたイノトゥス斜角抽出物によるヒト結腸直腸癌HCT-116細胞の増殖に対する阻害活性を調査しました。細胞生存率はMTTの減少によって測定され、細胞膜の完全性は乳酸デヒドロゲナーゼ（LDH）放出によって決定されました。アポトーシス促進および抗アポトーシスメディエーターのmRNA発現は、リアルタイムPCRによってアッセイされ、P53およびNF-κBP65のレベルをウエスタンブロット分析を使用して評価しました。さらに、HCT-116細胞に対するI. obliquus抽出物の影響は、カスパーゼ-3活性によって評価されました。結果は、ミトコンドリアのアポトーシス経路の場合、定量的RT-PCRデータがアポトーシス促進遺伝子（BAX、BAD、およびカスパーゼ-3）のアップレギュレーションを示し、I。によるBAX/Bcl-2比の増加として要約することができます。さらに、20 mg/ml I.で処理すると、斜め抽出物は、HCT-116細胞でカスパーゼ-3活性を増強します。細胞周期G0/G1相停止の誘導：I。斜めは、アポトーシス遺伝子（p53、p21WAF1/CIP1）のmRNA発現を上方制御し、抗アポトーシス遺伝子（Cyclind1）を下方制御し、I. obliquus菌菌の抽出はHCT-116細胞におけるP53タンパク質の表現を増加させました。I.斜め抽出物は、HCT-116細胞におけるNF-κBP65タンパク質とCOX-2遺伝子の発現を減少させました。I. obliquus抽出物は、結腸直腸癌の治療を改善するために、ヘルスケアのための潜在的に新しい食品材料として使用できます。
Because of irregular dietary habits and lifestyle in Taiwan, the incidence and mortality rate of colorectal cancer have been increasing rapidly these years. This study investigated the inhibitory activity against the proliferation of human colorectal cancer HCT-116 cells by Inonotus obliquus extracts obtained from submerged fermentation. Cell viability was measured by the reduction of MTT and cell membrane integrity was determined by lactic dehydrogenase (LDH) release. The mRNA expression of proapoptosis and antiapoptosis mediators was assayed by real-time PCR, and the levels of p53 and NF-κB p65 were assessed using Western blot analysis. Furthermore, the influences of I. obliquus extracts to HCT-116 cells were evaluated by caspase-3 activity. The results can be summarized as, for the mitochondrial apoptotic pathway, quantitative RT-PCR data showed up-regulation of proapoptotic genes (Bax, bad, and caspase-3) and increased Bax/bcl-2 ratio by I. obliquus extracts. Moreover, treating with 20 mg/mL I. obliquus extracts augmented caspase-3 activity in HCT-116 cells. Induction of cell cycle G0/G1 phase arrest: I. obliquus extracts up-regulated the mRNA expression of proapoptotic genes (p53, p21WAF1/CIP1) and down-regulated antiapoptotic gene (CyclinD1), while extracts of I. obliquus mycelia increased the expressions of p53 protein in HCT-116 cells. I. obliquus extracts decreased the expression of NF-κB p65 protein and COX-2 gene in HCT-116 cells. Taking together, I. obliquus extracts may be used as a potentially novel food material for health care to improve the treatment of colorectal cancer.
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