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Developmental biology2018Jan15Vol.433issue(2)

偽型バキュロウイルスは、軸索肢再生中に分子機能を研究するための効果的な遺伝子発現ツールです

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

Axolotlsは、成熟組織内の細胞の動員とリモデリングを通じて複雑な構造を再生できます。分子分解能で基礎となるメカニズムにアクセスすることは、傷害がどのように再生を引き起こし、それがどのように進行するかを理解するために重要です。ただし、成体組織の遺伝子形質転換は困難な場合があります。ここでは、成熟した四肢組織内および芽細胞内の両方の細胞の両方の効果的な遺伝子導入方法として、偽型バキュロウイルス(BV)を使用することを特徴づけています。これらの細胞は、形質導入後の再生に参加する能力があります。さらに、爆風でSHHを過剰発現することにより、遺伝子過剰発現研究に対するBVの有効性を特徴づけ、古典的なポリダクティの表現型の高い浸透度をもたらします。全体として、私たちの研究は、BVがAxolotl肢再生における遺伝子機能にアクセスするための強力なツールとして確立されています。

Axolotlsは、成熟組織内の細胞の動員とリモデリングを通じて複雑な構造を再生できます。分子分解能で基礎となるメカニズムにアクセスすることは、傷害がどのように再生を引き起こし、それがどのように進行するかを理解するために重要です。ただし、成体組織の遺伝子形質転換は困難な場合があります。ここでは、成熟した四肢組織内および芽細胞内の両方の細胞の両方の効果的な遺伝子導入方法として、偽型バキュロウイルス(BV)を使用することを特徴づけています。これらの細胞は、形質導入後の再生に参加する能力があります。さらに、爆風でSHHを過剰発現することにより、遺伝子過剰発現研究に対するBVの有効性を特徴づけ、古典的なポリダクティの表現型の高い浸透度をもたらします。全体として、私たちの研究は、BVがAxolotl肢再生における遺伝子機能にアクセスするための強力なツールとして確立されています。

Axolotls can regenerate complex structures through recruitment and remodeling of cells within mature tissues. Accessing the underlying mechanisms at a molecular resolution is crucial to understand how injury triggers regeneration and how it proceeds. However, gene transformation in adult tissues can be challenging. Here we characterize the use of pseudotyped baculovirus (BV) as an effective gene transfer method both for cells within mature limb tissue and within the blastema. These cells remain competent to participate in regeneration after transduction. We further characterize the effectiveness of BV for gene overexpression studies by overexpressing Shh in the blastema, which yields a high penetrance of classic polydactyly phenotypes. Overall, our work establishes BV as a powerful tool to access gene function in axolotl limb regeneration.

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