生物学的有機酸のHPLC-MS分析のための新しい誘導体化試薬

カルボン酸官能基を含む小分子は、生物学を通じて遍在しており、エネルギー代謝から細胞シグナル伝達に至るまでの生物化学的化学に重要な役割を果たしています。このホワイトペーパーでは、新しい誘導体化試薬、4-ブロモ-N-メチルベンジルアミンについて説明します。これは、トリカルボン酸（TCA）サイクルの中間体などのモノ、ディ、トリカルボン酸を誘導する可能性があるために選択されました。この誘導体化手順により、誘導体化された種の陽性識別種の陽性エレクトロスプレーイオン化（ESI）タンデム質量分析（MS/MS）検出が促進され、組み込まれた臭素の容易に認識可能な同位体パターンのおかげで明確な識別が可能になりました。液体クロマトグラフィー（LC）-MS/MSメソッドが開発されました。これにより、分析対象時間と総分析時間に応じて、6分未満で0.2〜44μgL-1の検出限界が得られました。この方法は、in vitroモデルとin vivoモデルの両方で正常に適用されました。

Small molecules containing carboxylic acid functional groups are ubiquitous throughout biology, playing vital roles in biological chemistry ranging from energy metabolism to cellular signaling. This paper describes a new derivatization reagent, 4-bromo-N-methylbenzylamine, which was selected for its potential to derivatize mono-, di- and tri-carboxylic acids, such as the intermediates of the tricarboxylic acid (TCA) cycle. This derivatization procedure facilitated the use of positive electrospray ionization (ESI) tandem mass spectrometry (MS/MS) detection of derivatized species allowing for clear identification thanks to the easily recognizable isotope pattern of the incorporated bromine. A liquid chromatography (LC)-MS/MS method was developed which provided limits of detection between 0.2 and 44 μg L-1 in under 6 min, depending on the analyte and total analysis time. This method was successfully applied in both in vitro and in vivo models.