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Pichia pastoris発現システムは、組換えタンパク質産生に広く使用されています。これまでのところ、異種タンパク質の大部分は、メタノール誘導性プロモーターPaox1および構成的プロモーターPGAPによって発現しています。他のプロモーターの使用はかなり限られています。ここでは、RNA-seqおよびRNA折りたたみの自由エネルギーΔGデータに基づいて、潜在的に効率的で調節的なプロモーター候補16を選択しました。これらのプロモーターの後にGFPと組換えアミラーゼを挿入して、さまざまな炭素源と培養尺度の下での強度と効率を明らかにしました。2つの新規プロモーターが正常に特定され、組換えタンパク質発現に適用される可能性があります:メタノール誘導性プロモーターP0547と構成的プロモーターP0472。
Pichia pastoris発現システムは、組換えタンパク質産生に広く使用されています。これまでのところ、異種タンパク質の大部分は、メタノール誘導性プロモーターPaox1および構成的プロモーターPGAPによって発現しています。他のプロモーターの使用はかなり限られています。ここでは、RNA-seqおよびRNA折りたたみの自由エネルギーΔGデータに基づいて、潜在的に効率的で調節的なプロモーター候補16を選択しました。これらのプロモーターの後にGFPと組換えアミラーゼを挿入して、さまざまな炭素源と培養尺度の下での強度と効率を明らかにしました。2つの新規プロモーターが正常に特定され、組換えタンパク質発現に適用される可能性があります:メタノール誘導性プロモーターP0547と構成的プロモーターP0472。
Pichia pastoris expression system has been widely used in recombinant protein production. So far the majority of heterologous proteins are expressed by methanol inducible promoter PAOX1 and constitutive promoter PGAP . The use of other promoters is rather limited. Here we selected 16 potentially efficient and regulatory promoter candidates based on the RNA-seq and RNA folding free energy ΔG data. GFP and recombinant amylase were inserted after these promoters to reveal their strength and efficiency under different carbon sources and culture scales. Two novel promoters were successfully identified and could possibly be applied in recombinant protein expression: the methanol-inducible promoter P0547 and the constitutive promoter P0472 .
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