ピリミジン二量体は、紫外線によるラムダファージDNAに誘発される主要な変性病変ではありません

紫外線（U.V.）光による変異誘発の過程におけるシクロブチルピリミジン二量体の役割を調べるために実験を実施しました。ラムダファージDNAにU.V.そして、目に見える光にさらされると、シクロブチルピリミジン二量体をモノマー化する酵素の大腸菌光反応性酵素とインキュベートします。光反応性DNAは、紫外線照射によってSOS機能のために誘導された大腸菌UVR宿主細胞に感染するために使用されたラムダファージ粒子にパッケージ化されました。光反応性は、ほとんどの毒性病変を照射ファージから除去しましたが、突然変異の誘導の頻度を透明な形の表現型に変化させませんでした。これは、シクロブチルピリミジン二量体が致命的である可能性があることを意味しますが、通常はファージの突然変異の部位として機能しません。光反応性DNAに由来する変異体のDNA配列は、ほぼ3分の2（16/28）が遷移であることを示しました。光反応性のない突然変異誘発。これらの結果は、このシステムでは、遷移を誘導する病変（U.V.誘導変異の主要なタイプ）がシクロブチルピリミジン二量体ではないことを示しています。変異原性病変の強い候補は、Pyr（6-4）Pyo光生成物です。一方、U.V。照射ファージに感染する前のSOS誘発宿主細胞の光反応性は、突然変異誘発を大幅に減少させました。この場合、シクロブチル二量体のフォトバーザーは、標的U.V.のプロセスで必要とされるSOS機能の発現を減らすのに役立ちます。突然変異誘発。

Experiments were performed to examine the role of cyclobutyl pyrimidine dimers in the process of mutagenesis by ultraviolet (u.v.) light. Lambda phage DNA was irradiated with u.v. and then incubated with an Escherichia coli photoreactivating enzyme, which monomerizes cyclobutyl pyrimidine dimers upon exposure to visible light. The photoreactivated DNA was packaged into lambda phage particles, which were used to infect E. coli uvr- host cells that had been induced for SOS functions by ultraviolet irradiation. Photoreactivation removed most toxic lesions from irradiated phage, but did not change the frequency of induction of mutations to the clear-plaque phenotype. This implies that cyclobutyl pyrimidine dimers can be lethal, but usually do not serve as sites of mutations in the phage. The DNA sequences of mutants derived from photoreactivated DNA showed that almost two-thirds (16/28) were transitions, the same fraction found for u.v. mutagenesis without photoreactivation. These results show that in this system, the lesion inducing transitions (the major type of u.v.-induced mutation) is not the cyclobutyl pyrimidine dimer; a strong candidate for a mutagenic lesion is the Pyr(6-4)Pyo photoproduct. On the other hand, photoreactivation of SOS-induced host cells before infection with u.v.-irradiated phage reduced mutagenesis substantially. In this case, photoreversal of cyclobutyl dimers serves to reduce expression of the SOS functions that are required in the process of targeted u.v. mutagenesis.