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非カナニカルアミノ酸の組み込みにより、タンパク質化学者はアミノ酸の拡大レパートリーにアクセスできます。この方法論により、タンパク質エンジニアリングの範囲が大幅に広がり、バイオオートゴーゴンの反応性ハンドル(アジドとアルキン)や疎水性フッ素化副鎖などの非ネイティブ機能を持つアミノ酸の導入が可能になりました。ここでは、細菌発現系を使用して、株式発現系を使用して、工学的緑色蛍光タンパク質におけるアジドノルルシンによるメチオニンの効率的な残基特異的置換について説明します。
非カナニカルアミノ酸の組み込みにより、タンパク質化学者はアミノ酸の拡大レパートリーにアクセスできます。この方法論により、タンパク質エンジニアリングの範囲が大幅に広がり、バイオオートゴーゴンの反応性ハンドル(アジドとアルキン)や疎水性フッ素化副鎖などの非ネイティブ機能を持つアミノ酸の導入が可能になりました。ここでは、細菌発現系を使用して、株式発現系を使用して、工学的緑色蛍光タンパク質におけるアジドノルルシンによるメチオニンの効率的な残基特異的置換について説明します。
The incorporation of noncanonical amino acids has given protein chemists access to an expanded repertoire of amino acids. This methodology has significantly broadened the scope of protein engineering allowing introduction of amino acids with non-native functionalities, such as bioorthogonal reactive handles (azides and alkynes) and hydrophobic fluorinated side chains. Here, we describe the efficient residue-specific replacement of methionine by azidonorleucine in an engineered green fluorescent protein using a bacterial expression system to introduce a single reactive site for the strain-promoted azide-alkyne cycloaddition.
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