新しい潜在的な疾患修飾抗リウマチ薬としての強力なプロスタグランジンE2受容体4拮抗薬のCR6086の薬理学的特性

背景：プロスタグランジンE2（PGE2）は、そのEP4受容体を介してサイトカイン増幅器（例：インターロイキン[IL] -6）として作用し、炎症性Tヘルパー（TH）リンパ球の分化と拡大を誘導します。これらのメカニズムは、関節リウマチ（RA）の発症と進行に重要な役割を果たします。新規EP4受容体拮抗薬であるCR6086の薬理学的特性を提示し、疾患修飾抗リウマチ薬（DMARD）としての可能性の証拠を提供します。 方法：CR6086親和性と薬力学は、それぞれ放射性リガンド結合および環状アデノシン単リン酸（CAMP）産生によってEP4発現HEK293細胞で研究されました。免疫細胞では、IL-6および血管内皮成長因子（VEGF）発現をRT-PCRによって分析し、IL-23およびIL-17放出を酵素結合免疫吸着剤アッセイ（ELISA）で測定しました。コラーゲン誘発性関節炎（CIA）モデルでは、ラットまたはマウスにウシコラーゲンII型と免疫しました。薬物は、疾患の発症から始まる経口（エタネルセプトおよびメトトレキサート腹腔内）投与されました。関節炎の進行は、浮腫、臨床スコア、および組織病理学によって評価されました。抗コラーゲンII免疫グロブリンG抗体はELISAによって測定されました。 結果：CR6086は、ヒトEP4受容体（KI = 16.6 nm）に対する選択性と高い親和性を示し、PGE2刺激cAMP産生の純粋な拮抗薬（半最大阻害濃度、22 nm）として機能しました。培養中のヒト免疫細胞のモデルでは、CR6086はRAの主要なサイトカインプレーヤー（マクロファージにおけるIL-6およびVEGF発現、樹状細胞からのIL-23放出、TH17細胞からのIL-17放出）を減少させました。ラットとマウスのRAのCIAモデルでは、CR6086が関節炎のすべての特徴を大幅に改善しました：重症度、組織学、炎症、痛み。ラットでは、CR6086は選択的シクロオキシゲナーゼ-2阻害剤ロフェコキシブよりも優れており、少なくともヤヌスキナーゼ阻害剤トファシチニブと同じくらい効果的でした。マウスでは、CR6086および生物学的Dmardエタネルセプトは非常に効果的でしたが、非ステロイド性抗炎症薬ナプロキセンは効果がありませんでした。重要なことに、CR6086/メトトレキサートの研究では、組み合わせた治療により、メトトレキサートの完全免疫抑制量の効果が大幅に改善されました。 結論：CR6086は、好ましい免疫調節特性を示す新規で強力なEP4拮抗薬であり、げっ歯類のDMARD効果を顕著にし、免疫媒介炎症性疾患を標的とし、シクロオキシゲナーゼ阻害剤の一般的な効果とは異なる抗炎症活性です。これらの結果は、CR6086の臨床開発をサポートしています。これは、スタンドアロンDMARDおよびメトトレキサートとの併用療法としてです。RA患者の概念実証試験は進行中です。

BACKGROUND: Prostaglandin E2 (PGE2) acts via its EP4 receptor as a cytokine amplifier (e.g., interleukin [IL]-6) and induces the differentiation and expansion of inflammatory T-helper (Th) lymphocytes. These mechanisms play a key role in the onset and progression of rheumatoid arthritis (RA). We present the pharmacological characterisation of CR6086, a novel EP4 receptor antagonist, and provide evidence for its potential as a disease-modifying anti-rheumatic drug (DMARD). METHODS: CR6086 affinity and pharmacodynamics were studied in EP4-expressing HEK293 cells by radioligand binding and cyclic adenosine monophosphate (cAMP) production, respectively. In immune cells, IL-6 and vascular endothelial growth factor (VEGF) expression were analysed by RT-PCR, and IL-23 and IL-17 release were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). In collagen-induced arthritis (CIA) models, rats or mice were immunised with bovine collagen type II. Drugs were administered orally (etanercept and methotrexate intraperitoneally) starting at disease onset. Arthritis progression was evaluated by oedema, clinical score and histopathology. Anti-collagen II immunoglobulin G antibodies were measured by ELISA. RESULTS: CR6086 showed selectivity and high affinity for the human EP4 receptor (Ki = 16.6 nM) and functioned as a pure antagonist (half-maximal inhibitory concentration, 22 nM) on PGE2-stimulated cAMP production. In models of human immune cells in culture, CR6086 reduced key cytokine players of RA (IL-6 and VEGF expression in macrophages, IL-23 release from dendritic cells, IL-17 release from Th17 cells). In the CIA model of RA in rats and mice, CR6086 significantly improved all features of arthritis: severity, histology, inflammation and pain. In rats, CR6086 was better than the selective cyclooxygenase-2 inhibitor rofecoxib and at least as effective as the Janus kinase inhibitor tofacitinib. In mice, CR6086 and the biologic DMARD etanercept were highly effective, whereas the non-steroidal anti-inflammatory drug naproxen was ineffective. Importantly, in a study of CR6086/methotrexate, combined treatment greatly improved the effect of a fully immunosuppressive dose of methotrexate. CONCLUSIONS: CR6086 is a novel, potent EP4 antagonist showing favourable immunomodulatory properties, striking DMARD effects in rodents, and anti-inflammatory activity targeted to immune-mediated inflammatory diseases and distinct from the general effects of cyclooxygenase inhibitors. These results support the clinical development of CR6086, both as a stand-alone DMARD and as a combination therapy with methotrexate. The proof-of-concept trial in patients with RA is ongoing.