C57BL/6マウスに移植可能な確立された胃癌細胞株は、線維芽細胞成長因子受容体を示し、腫瘍成長の促進

以前は、C57BL/6マウスへの移植に使用できるマウス胃癌細胞株はありませんでした。ただし、免疫適格マウスの胃癌モデルは、推定療法の分析に役立ちます。N-メチル-N-ニトロソーレア（MNU）は、C57BL/6マウスとp53ヘテロ接合ノックアウトマウスに飲料水で投与されました。p53ノックアウトマウスからの腫瘍のみを培養でき、細胞s.c.C57BL/6マウスに移植されました。このs.cを培養しました。腫瘍、そしてそれをサブクローニングしました。最も攻撃的なYTN16サブリンにおけるmRNA発現は、マイクロアレイ分析により攻撃性の低いYTN2サブリンと比較され、YTN16細胞の線維芽細胞成長因子受容体4（FGFR4）をCRISPR/CAS9システムでノックアウトし、FGFR4選択的阻害薬、BLU9931によって阻害されました。これらの移植された細胞株はs.cを形成しました。C57BL/6マウスの腫瘍。4つの細胞株（YTN2、YTN3、YTN5、YTN16）がサブクローニングされ、確立されました。彼らのin vitro成長率は似ていました。ただし、S.C。YTN2およびYTN3の腫瘍の確立率、転移率、および腹膜播種率は、YTN5およびYTN16よりも低かった。YTN16は8/8 S.C.を確立しました腫瘍、肺転移を備えた7/8、リンパ節転移を備えた3/8、腹膜播種を伴う5/5。YTN16によるFGFR4発現は、YTN2より12倍高かった。FGFR4削除されたYTN16細胞は、S.Cを形成できませんでした。腫瘍と腹膜播種の速度が低いことを示しました。BLU9931は、YTN16の腹膜播種の成長を著しく阻害しました。これらの研究は、最初の移植可能なマウス胃癌系統を提示します。我々の結果は、FGFR4がFGFR4発現が高い胃癌細胞の重要な成長シグナル受容体であることをさらに示しています。

Previously no mouse gastric cancer cell lines have been available for transplantation into C57BL/6 mice. However, a gastric cancer model in immunocompetent mice would be useful for analyzing putative therapies. N-Methyl-N-nitrosourea (MNU) was given in drinking water to C57BL/6 mice and p53 heterozygous knockout mice. Only 1 tumor from a p53 knockout mouse could be cultured and the cells s.c. transplanted into a C57BL/6 mouse. We cultured this s.c. tumor, and subcloned it. mRNA expression in the most aggressive YTN16 subline was compared to the less aggressive YTN2 subline by microarray analysis, and fibroblast growth factor receptor 4 (FGFR4) in YTN16 cells was knocked out with a CRISPR/Cas9 system and inhibited by an FGFR4 selective inhibitor, BLU9931. These transplanted cell lines formed s.c. tumors in C57BL/6 mice. Four cell lines (YTN2, YTN3, YTN5, YTN16) were subcloned and established. Their in vitro growth rates were similar. However, s.c. tumor establishment rates, metastatic rates, and peritoneal dissemination rates of YTN2 and YTN3 were lower than for YTN5 and YTN16. YTN16 established 8/8 s.c. tumors, 7/8 with lung metastases, 3/8 with lymph node metastases and 5/5 with peritoneal dissemination. FGFR4 expression by YTN16 was 121-fold higher than YTN2. FGFR4-deleted YTN16 cells failed to form s.c. tumors and showed lower rates of peritoneal dissemination. BLU9931 significantly inhibited the growth of peritoneal dissemination of YTN16. These studies present the first transplantable mouse gastric cancer lines. Our results further indicate that FGFR4 is an important growth signal receptor in gastric cancer cells with high FGFR4 expression.