Plumbaginは、PVRのP38マークおよびPI3K/AKT/MTORシグナル伝達経路を介してRPE細胞周期停止とアポトーシスを誘導します

背景：この研究は、ARPE-19細胞および基礎となるメカニズムに対するプランバギン（PLB）の効果を調査することを目的としています。 方法：培養ARPE-19細胞を、PLBのさまざまな濃度（0、5、15、および25μM）で24時間、または12、24、48時間15μMPLBで処理しました。次に、細胞生存率をMTTアッセイとDAPI染色によって評価しましたが、ARPE細胞のアポトーシスと細胞周期の進行は、フローサイトメトリー分析によって評価されました。さらに、主要な調節タンパク質のレベルを西部のボルトで検査し、相対mRNAの発現をリアルタイムPCRによってテストしました。 結果：PLBは、G2/M相での細胞周期停止に対する強力な誘導効果と、濃度および時間依存的な方法でのBcl-2ファミリー調節因子の調節を介してARPE細胞のアポトーシスに対する効果を示しました。PLBは、ARPE細胞の抗増殖活性に寄与するホスファチジルイノシトール3-キナーゼ（PI3K）およびP38マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（P38 MAPK）シグナル伝達経路の阻害を誘導しました。 結論：これは、PLBが調節性シグナル伝達経路のダウンレギュレーションを介してRPE細胞の増殖を阻害できることを示す最初のレポートです。結果は、増殖性硝子体網膜症の予防と治療におけるPLBの使用のための新しい手段を開きます。

BACKGROUND: This study aimed to explore the effects of plumbagin (PLB) on ARPE-19 cells and underlying mechanism. METHODS: Cultured ARPE-19 cells were treated with various concentrations (0, 5, 15, and 25 μM) of PLB for 24 h or with 15 μM PLB for 12, 24 and 48 h. Then cell viability was evaluated by MTT assay and DAPI staining, while apoptosis and cell cycle progression of ARPE cells were assessed by flow cytometric analysis. Furthermore, the level of main regulatory proteins was examinated by Western boltting and the expression of relative mRNA was tested by Real-Time PCR. RESULTS: PLB exhibited potent inducing effects on cell cycle arrest at G2/M phase and apoptosis of ARPE cells via the modulation of Bcl-2 family regulators in a concentration- and time-dependent manner. PLB induced inhibition of phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) and p38 mitogen-activated protein kinase (p38 MAPK) signaling pathways contributing to the anti-proliferative activities in ARPE cells. CONCLUSIONS: This is the first report to show that PLB could inhibit the proliferation of RPE cells through down-regulation of modulatory signaling pathways. The results open new avenues for the use of PLB in prevention and treatment of proliferative vitreoretinopathy.