Lactobacillus gasseriとL Crispatusの培養上清を阻害するカンジダアルビカンスバイオフィルム形成とHeLa細胞への接着

目的：外陰膣カンジダ症（VVC）は、カンジダアルビカンス菌によって引き起こされる膣粘膜の一般的な表在性感染症です。この研究の目的は、C。albicansバイオフィルム形成のアジアの健康な女性の主要な微生物叢であるLactobacillus gasseriとL. Crispatusの培養上清の阻害効果の根底にあるメカニズムを評価することでした。ラクトバチルス培養上清によるHeLa細胞へのC. albicansの接着の阻害も調査されました。 方法：カンジダアルビカンスバイオフィルムは、ポリスチレンフラットボトーム96ウェルプレートに形成され、XTT還元アッセイを使用して、初期コロニー形成段階と成熟段階に対する阻害効果を決定しました。バイオフィルム形成関連遺伝子（HWP1、ECE1、ALS3、BCR1、EFG1、TEC1、およびCPH1）の発現レベルは、逆転写の定量的ポリメラーゼ連鎖反応によって決定されました。ラクトバチルス培養上清によるC. albicansの接着の阻害は、生存可能なC. albicans細胞を列挙することにより評価されました。 結果：両方のラクトバチルス種の培養上清は、C。albicansバイオフィルムの最初のコロニー形成と成熟を阻害しました。すべてのバイオフィルム形成関連遺伝子の発現レベルは、ラクトバチルス培養上清の存在下でダウンレギュレートされました。培養上清はまた、C。albicansのHeLa細胞への接着を阻害しました。 結論：L。gasseriとL. Crispatusの培養上清は、バイオフィルム形成関連遺伝子とC. albicansの接着をダウンレギュレートすることによりC. albicansバイオフィルム形成を阻害しました。これらの発見は、Lactobacillus代謝産物がVVCの管理のための抗真菌薬の代替品である可能性があるという概念を支持しています。

PURPOSE: Vulvovaginal candidiasis (VVC) is a common superficial infection of the vaginal mucous membranes caused by the fungus Candida albicans. The aim of this study was to assess the mechanisms underlying the inhibitory effects of the culture supernatants of Lactobacillus gasseri and L. crispatus, the predominant microbiota in Asian healthy women, on C. albicans biofilm formation. The inhibition of C. albicans adhesion to HeLa cells by Lactobacillus culture supernatant was also investigated. METHODS: Candida albicans biofilm was formed on polystyrene flat-bottomed 96-well plates, and the inhibitory effects on the initial colonization and maturation phases were determined using the XTT reduction assay. The expression levels of biofilm formation-associated genes (HWP1, ECE1, ALS3, BCR1, EFG1, TEC1, and CPH1) were determined by reverse transcription quantitative polymerase chain reaction. The inhibition of C. albicans adhesion to HeLa cells by Lactobacillus culture supernatant was evaluated by enumerating viable C. albicans cells. RESULTS: The culture supernatants of both Lactobacillus species inhibited the initial colonization and maturation of C. albicans biofilm. The expression levels of all biofilm formation-related genes were downregulated in the presence of Lactobacillus culture supernatant. The culture supernatant also inhibited C. albicans adhesion to HeLa cells. CONCLUSION: The culture supernatants of L. gasseri and L. crispatus inhibited C. albicans biofilm formation by downregulating biofilm formation-related genes and C. albicans adhesion to HeLa cells. These findings support the notion that Lactobacillus metabolites may be useful alternatives to antifungal drugs for the management of VVC.