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背景：プロタミンは最も豊富な精子核タンパク質であり、哺乳類の精子DNAの約92〜98％を詰め込みます。哺乳類では、プロタミン1（P1）とプロタミン2（P2）ファミリー、2種類のプロタミンが報告されています。相対P1/P2比の規制緩和は、DNA損傷、独創的なパラメーターの変化、および補給支援技術の成功率の低いと相関しています。さらに、プロタミンの抽出と分析は、精子クロマチンの構造と機能の基本的側面、種間のプロタミン配列保存、および不妊男性に存在する精子クロマチンの変化を理解するために重要でした。しかし、プロタミンは、その特別なアミノ酸配列のために特定の化学的性質を示し、アルギニンおよびシステイン残基が非常に豊富です。これらのプロタミンの特異な特性のため、それらの抽出と分析は、多くの詳細なプロトコルがすでに利用可能である他のクロマチン関連タンパク質の分析ほど簡単ではありません。 結論：実装に関心のある研究者へのプロタミン分析を促進するには、段階的なプロトコルが必要でした。したがって、このニーズを満たすために貢献するために、ここでは詳細なプロトコルを提供します。これは、プロタミン分野に関心のあるチームや研究所に役立つはずです。さらに、これまでに公開されたさまざまな研究をプロタミンの変化と男性の不妊について簡単にレビューします。
背景：プロタミンは最も豊富な精子核タンパク質であり、哺乳類の精子DNAの約92〜98％を詰め込みます。哺乳類では、プロタミン1（P1）とプロタミン2（P2）ファミリー、2種類のプロタミンが報告されています。相対P1/P2比の規制緩和は、DNA損傷、独創的なパラメーターの変化、および補給支援技術の成功率の低いと相関しています。さらに、プロタミンの抽出と分析は、精子クロマチンの構造と機能の基本的側面、種間のプロタミン配列保存、および不妊男性に存在する精子クロマチンの変化を理解するために重要でした。しかし、プロタミンは、その特別なアミノ酸配列のために特定の化学的性質を示し、アルギニンおよびシステイン残基が非常に豊富です。これらのプロタミンの特異な特性のため、それらの抽出と分析は、多くの詳細なプロトコルがすでに利用可能である他のクロマチン関連タンパク質の分析ほど簡単ではありません。 結論：実装に関心のある研究者へのプロタミン分析を促進するには、段階的なプロトコルが必要でした。したがって、このニーズを満たすために貢献するために、ここでは詳細なプロトコルを提供します。これは、プロタミン分野に関心のあるチームや研究所に役立つはずです。さらに、これまでに公開されたさまざまな研究をプロタミンの変化と男性の不妊について簡単にレビューします。
BACKGROUND: Protamines are the most abundant sperm nuclear proteins and pack approximately the 92-98% of the mammalian sperm DNA. In mammals, two types of protamines have been described, the Protamine 1 (P1) and the Protamine 2 (P2) family. The deregulation of the relative P1/P2 ratio has been correlated to DNA damage, alterations in seminal parameters, and low success rate of assisted reproduction techniques. Additionally, the extraction and analysis of protamines have been important to understand the fundamental aspects of the sperm chromatin structure and function, protamine sequence conservation among species, and sperm chromatin alterations present in infertile males. However, protamines show a particular chemical nature due to its special amino acid sequence, extremely rich in arginine and cysteine residues. Because of these peculiar characteristics of protamines, their extraction and analysis is not as straightforward as the analysis of other chromatin-associated proteins, for which many detailed protocols are already available. CONCLUSION: A step-by-step protocol was needed to facilitate protamine analysis to researchers interested in their implementation. Therefore, in order to contribute to fulfill this need, here we provide a detailed protocol, which should be useful to research teams and laboratories interested in the protamine field. In addition, we also briefly review the different studies published so far on protamine alterations and male infertility.
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