P2Y12拮抗薬チカグレロールは、活性化された血小板からの凝固剤凝固剤外部小胞の放出を阻害します

背景：活性化された血小板は、血小板細胞外小胞（PEV）を放出します。アデノシン二リン酸（ADP）受容体P2Y1とP2Y12はどちらも血小板活性化に役割を果たします。ここでの現在の仮説は、これらの受容体の阻害がPEVの放出に影響を与える可能性があるということです。 方法：10人の健康な被験者の血小板豊富な血漿を、生理食塩水、P2Y1拮抗薬MRS2179（100μM）、P2Y12拮抗薬チカグレロール（1μM）、および両方の拮抗薬の組み合わせとインキュベートしました。37°Cで攪拌条件下で、血小板をADP（10μM）で活性化しました。血小板反応性は、インピーダンスの凝集によって評価されました。PEVSの濃度 - （CD61で陽性ですが、p-セレクチンとホスファチジルセリンは陰性）およびPEVS+（すべての陽性）は、最先端のフローサイトメーターによって決定されました。PEVの凝固剤活性は、フィブリン生成試験によって測定されました。 結果：ADP誘導凝集（57±13曲線下面積{AUC]単位）は、P2Y1拮抗薬によって73％、P2Y12拮抗薬で86％、合計すると95％（P <0.001）。PEVS-（2.9 E±0.8×10⁸/mL）の放出は、両方の拮抗薬の存在下で48％阻害されましたが（P = 0.015）、アンタゴニストだけでは効果がありませんでした。PEVS+（2.4±1.6×10⁷/ml）の放出は、P2Y1拮抗薬の影響を受けませんでしたが、P2Y12拮抗薬によって62％阻害され（P = 0.035）、両方の拮抗薬（P = 0.022）によって72％が阻害されました。PEVは、組織因子の存在下で凝固を促進しました。 結論：P2Y1およびP2Y12受容体の阻害は、血小板凝集を減少させ、PEVの異なる亜集団の放出に影響を与えます。Ticagrelorは、活性化された血小板からの凝固剤PEVの放出を減少させます。

BACKGROUND: Activated platelets release platelet extracellular vesicles (PEVs). Adenosine diphosphate (ADP) receptors P2Y1 and P2Y12 both play a role in platelet activation, The present hypothesis herein is that the inhibition of these receptors may affect the release of PEVs. METHODS: Platelet-rich plasma from 10 healthy subjects was incubated with saline, P2Y1 antagonist MRS2179 (100 μM), P2Y12 antagonist ticagrelor (1 μM), and a combination of both antagonists. Platelets were activated by ADP (10 μM) under stirring conditions at 37°C. Platelet reactivity was assessed by impedance aggregometry. Concentrations of PEVs- (positive for CD61 but negative for P-selectin and phosphatidylserine) and PEVs+ (positive for all) were determined by a state-of-the-art flow cytometer. Procoagulant activity of PEVs was measured by a fibrin generation test. RESULTS: ADP-induced aggregation (57 ± 13 area under curve {AUC] units) was inhibited 73% by the P2Y1 antagonist, 86% by the P2Y12 antagonist, and 95% when combined (p < 0.001 for all). The release of PEVs- (2.9 E ± 0.8 × 10⁸/mL) was inhibited 48% in the presence of both antagonists (p = 0.015), whereas antagonists alone were ineffective. The release of PEVs+ (2.4 ± 1.6 × 10⁷/mL) was unaffected by the P2Y1 antagonist, but was 62% inhibited by the P2Y12 antagonist (p = 0.035), and 72% by both antagonists (p = 0.022). PEVs promoted coagulation in presence of tissue factor. CONCLUSIONS: Inhibition of P2Y1 and P2Y12 receptors reduces platelet aggregation and affects the release of distinct subpopulations of PEVs. Ticagrelor decreases the release of procoagulant PEVs from activated platelets, which may contribute to the observed clinical benefits in patients treated with ticagrelor.