IgG4治療抗体薬物共役のin vivo半抗体交換の機能的関連性

抗体薬物コンジュゲート（ADC）などのモノクローナル抗体と誘導体の増加は、明確な構造的および機能的特性を持つIgG1およびIgG4アイソタイプのものです。FC領域は抗体依存性細胞媒介または補体依存性細胞毒性の誘導が比較的低いため、抗体媒介細胞毒性が望まれない場合、IgG4がよく使用されます。増殖する標的細胞に対して非常に細胞毒性薬物を伴うIgG4 ADCは、静止細胞に対する抗体エフェクター機能を欠いている、または低下させている場合、IgG1と比較して好ましい安全性プロファイルを持っている可能性があります。IgG4サブクラスのもう1つのユニークな特性は、in vivoで半分の抗体を交換する能力であり、ランダムに双極性抗体を生成します。プロセス由来の抗体種の機能特性を調査し、治療効果に対するシャッフルの影響を決定するために、抗CD138抗体薬物コンジュゲートBT062（indatuximab ravtansine）に基づいたいくつかのモデル抗体が生成されました。野生型NBT062、（ii）半分抗体交換を防ぐための変異を含む安定したNBT062、（iii）2つの重鎖の間の共有結合結合を欠いている半分のNBT062、および（iv）2番目の単独特異性を伴う安定化された二重特異的NBT062-ナタリズマブ抗体を備えた（iv）CD49Dに対して。すべてのNBT062モデルバリアントは、CD138特異的結合および抗原を介した細胞への内在化が可能でした。さらに、すべてのNBT062モデルは、メイタンシノイドDM4との結合後、in vitroで腫瘍の成長を阻害しました。異なる分子バリアントの生体内効果は、MAXF1322異種移植モデルで評価されました。バイスピークNBT062-ナタリズマブ-DM4は、有効性が最も低いことを実証し、人間のIgG調製の共同投与がなくても中程度に活動していました。野生型、安定性、および半分のNBT062-DM4モデルは、優れた抗腫瘍活動を実証しました。野生型と半分のNBT062-DM4の有効性はIgGの存在下で減少しましたが、安定したNBT062-DM4はわずかに影響を受けました。これらの臨床データは、治療的IgG4ベースの抗体薬物結合に半抗体交換予防突起を導入する利点を示しています。

An increasing number of monoclonal antibodies and derivatives such as antibody-drug conjugates (ADC) are of the IgG1 and IgG4 isotype with distinct structural and functional properties. In cases where antibody-mediated cytotoxicity is not desired, IgG4 is often used, as its Fc region is relatively poor at inducing antibody-dependent cell-mediated or complement-dependent cytotoxicity. IgG4 ADCs with highly cytotoxic drugs against proliferating target cells but which lack or have diminished antibody effector functions against quiescent cells may have a favorable safety profile compared to IgG1. Another unique property of the IgG4 subclass is the capability to exchange half antibodies in vivo creating randomly bispecific antibodies. To investigate the functional properties of process-derived antibody species, and determine the influence of shuffling on the therapeutic efficacy, several model antibodies on the basis of the anti-CD138 antibody-drug conjugate BT062 (Indatuximab ravtansine) were generated: (I) A wild type nBT062, (II) a stable nBT062 comprising mutations to prevent half-antibody exchange, (III) a half nBT062 lacking covalent binding between two heavy chains and (IV) a stabilized, bispecific nBT062-natalizumab antibody with a second, monovalent specificity against CD49d. All nBT062 model variants were capable of CD138-specific binding and antigen-mediated internalization into cells. Furthermore, all nBT062 models inhibited tumor growth in vitro after conjugation with the maytansinoid DM4. The in vivo effects of the different molecular variants were assessed in the MAXF1322 xenograft model. The bispecific nBT062-natalizumab-DM4 demonstrated the least efficacy and was only moderately active even without the co-administration of a human IgG preparation. Wild type, stable and half nBT062-DM4 models demonstrated great anti-tumor activities. The efficacy of wild type and half nBT062-DM4 was reduced in the presence of IgG, while stable nBT062-DM4 was only marginally influenced. These pre-clinical data demonstrate the advantage of introducing half-antibody exchange-preventing mutations into therapeutic IgG4-based antibody drug-conjugates.