CPT1A阻害剤、エトモキシルは、一般的に使用される濃度で重度の酸化ストレスを誘導します

エトモキシル（ETO）は、カルニチンパルミトイルトランスフェラーゼ1A（CPT1A）に対する不可逆的な阻害効果を介して、脂肪酸酸化（FAO）の広く使用されている小分子阻害剤です。この化合物を使用して、CD28受容体を介した共刺激後の急速に増殖するT細胞における脂肪酸酸化の役割を評価しました。ETOはT細胞増殖に中程度の効果があり、記憶分化に観察可能な効果はありませんが、酸化的代謝に顕著な効果があることを示しています。この酸化的代謝は、主にFAOではなくグルタミンに依存していることを示しています。shRNAアプローチを使用してT細胞のCPT1Aを減少させると、ETOによるT細胞の酸化代謝の阻害は、5μMを超える濃度でのFAOへの影響とは無関係であることをさらに実証します。5μmを超えるETOの濃度は、増殖性T細胞における重度の酸化ストレスの関連する証拠を持つROSの急性産生を誘導します。凝集体では、これらのデータは、ETOが5μMを超えるCTP1Aの特異性を欠いていることを示しており、酸化的代謝と細胞酸化還元に対する非特異的効果のために、細胞の研究にこの化合物を使用する場合は注意が必要であることを示しています。

Etomoxir (ETO) is a widely used small-molecule inhibitor of fatty acid oxidation (FAO) through its irreversible inhibitory effects on the carnitine palmitoyl-transferase 1a (CPT1a). We used this compound to evaluate the role of fatty acid oxidation in rapidly proliferating T cells following costimulation through the CD28 receptor. We show that ETO has a moderate effect on T cell proliferation with no observable effect on memory differentiation, but a marked effect on oxidative metabolism. We show that this oxidative metabolism is primarily dependent upon glutamine rather than FAO. Using an shRNA approach to reduce CPT1a in T cells, we further demonstrate that the inhibition of oxidative metabolism in T cells by ETO is independent of its effects on FAO at concentrations exceeding 5 μM. Concentrations of ETO above 5 μM induce acute production of ROS with associated evidence of severe oxidative stress in proliferating T cells. In aggregate, these data indicate that ETO lacks specificity for CTP1a above 5 μM, and caution should be used when employing this compound for studies in cells due to its non-specific effects on oxidative metabolism and cellular redox.