NLRP3インフラマソームの活性化は、RBCの年齢のクリアランスを調節します

NLRファミリーピリンドメイン含有タンパク質3（NLRP3）インフラマソームは、さまざまな刺激によって引き起こされます。老化したまたは損傷した赤血球の単球除去中にNLRP3インフラマソームが活性化されるかどうかは不明です。この研究の目的は、老化した赤血球のTHP-1細胞巻き込み中にNLRP3インフラマソームが活性化されるかどうかを判断することを目的としています。この研究では、THP-1細胞をPMAで処理し、次に未処理の赤血球（RBC）、42°C処理RBC、免疫グロブリンG（IgG）抗D感染RBC、RHNULL/RHMOD RBCサンプル、ヘモグロビンのサンプルと併用しました。、およびRBCゴースト。NLRP3インフラマソームの活性化と炎症誘発性サイトカインの産生は、免疫ブロット、サイトメトリックビーズアレイ、およびデジタルPCRを使用して決定されました。NLRP3インフラマソーム阻害剤も、NLRP3の活性化とRBCクリアランス率の変化を評価するために使用されました。未処理のRBC、42°CインキュベートRBC、IgG-陽性RBC、RHNULL/RHMOD RBC、RBCゴースト、およびヘモグロビンは、NLRP3インフラマスームのTHP-1細胞媒介性の活性化と炎症性シトキンの生産を誘導しました。RBCクリアランス率は、炎症性サイトカインの発現と正の相関を示しました。NLRP3インフラマソーム阻害剤は、NLRP3の活性化とRBC食作用率を減少させました。NLRP3インフラマソームは、老化していないオプソン化された経路を介して、老化した赤血球のクリアランス中に活性化されました。ただし、そのような現象のメカニズムをさらに解明する必要があります。このようなメカニズムは、サイトカインレベルに基づいて、輸血の長いストレージRBCの安全性の評価に関する新しい洞察を提供する可能性があります。

The NLR family pyrin domain-containing protein 3 (NLRP3) inflammasome is triggered by various stimuli. Whether the NLRP3 inflammasome is activated during the monocyte clearing of aged or damaged erythrocytes is unknown. This work aimed to determine whether the NLRP3 inflammasome is activated during the THP-1 cell engulfing of aged erythrocytes. In the study, THP-1 cells were treated with PMA and then coincubated with untreated red blood cells (RBCs), 42 °C-treated RBCs, immunoglobulin G (IgG) anti-D-sensitized RBCs, Rhnull/Rhmod RBC sample, hemoglobin, and RBC ghost. The activation of the NLRP3 inflammasome and production of some proinflammatory cytokines were determined using immunoblotting, cytometric bead array, and digital PCR. An NLRP3 inflammasome inhibitor was also used to evaluate the alteration of the NLRP3 activation and RBC clearance rate. The untreated RBCs, 42 °C-incubated RBCs, IgG-opsonized RBCs, Rhnull/Rhmod RBCs, RBC ghosts, and hemoglobin induced the THP-1-cell-mediated activation of the NLRP3 inflammasome and the production of inflammatory cytokines. The RBC clearance rate exhibited a positive correlation with the expression of proinflammatory cytokines. The NLRP3 inflammasome inhibitor reduced the NLRP3 activation and RBC phagocytosis rate. The NLRP3 inflammasome was activated during the clearance of the aged erythrocytes through unopsonized and opsonized pathways. However, the mechanism of such phenomenon needs to be further elucidated. Such mechanism may provide new insight into the assessment of the safety of transfusing long-storage RBC based on cytokine levels.