アセチルシコニンは、Wnt/β-カテニンシグナル伝達を阻害することにより、アンジオテンシンII誘導性増殖と運動性を減衰させます。

脳血管平滑筋細胞の増殖と移動は、脳血管リモデリングと脳卒中の場合の過形成の一因となります。本研究では、アンジオテンシンII（ANGII）および基礎となるメカニズムによって誘発されるヒト脳血管平滑筋細胞（HBVSMC）の増殖と移動に対する、中国の伝統医療Zicaoの主要成分であるアセチルシコニンの影響を調査しました。アセチルシコニン治療は、G1からS相へのAngii誘発HBVSMCSの増殖と細胞周期の移行を有意に阻害することがわかりました。創傷治癒アッセイとトランスウェルアッセイは、アンジー誘発細胞の移動と浸潤がアセチルシコニンによって著しく減衰することを示しました。さらに、ANGIIチャレンジは、β-カテニンのリン酸化と核移行およびGSK-3βのリン酸化の増加によって証明されるように、Wnt/β-カテニンシグナル伝達の活性化を有意に誘導しました。しかし、アセチルシコニン治療は、Wnt/β-カテニンシグナル伝達の活性化を阻害しました。その結果、ウエスタンブロッティング分析により、アセチルシコニンは、C-MYC、サバイビン、サイクリンD1を含む、Angii-treated細胞における下流の標的遺伝子の発現を効果的に減少させ、HBVSMCS増殖に対するアセチルシコニンの阻害効果に寄与したことが明らかになりました。さらに、組換えWNT3Aによる刺激は、HBVSMCSにおける増殖および細胞周期の移行のアセチルシコニン媒介阻害を劇的に逆転させました。我々の研究は、アセチルシコニンがWnt/β-カテニン経路の阻害を通じてアンジー誘発性脳血管平滑筋細胞の増殖と移動を予防することを示しており、アセチルシコニンが脳血管リモデリングの治療の可能性を示す可能性があることを示しています。

Cerebrovascular smooth muscle cell proliferation and migration contribute to hyperplasia in case of cerebrovascular remodeling and stroke. In the present study, we investigated the effects of acetylshikonin, the main ingredient of a Chinese traditional medicine Zicao, on human brain vascular smooth muscle cell (HBVSMCs) proliferation and migration induced by angiotensin II (AngII), and the underlying mechanisms. We found that acetylshikonin treatment significantly inhibited AngII-induced HBVSMCs proliferation and cell cycle transition from G1 to S phase. Wound-healing assay and Transwell assay showed that AngII-induced cell migration and invasion were markedly attenuated by acetylshikonin. In addition, AngII challenge significantly induced Wnt/β-catenin signaling activation, as evidenced by increased β-catenin phosphorylation and nuclear translocation and GSK-3β phosphorylation. However, acetylshikonin treatment inhibited the activation of Wnt/β-catenin signaling. Consequently, western blotting analysis revealed that acetylshikonin effectively reduced the expression of downstream target genes in AngII-treated cells, including c-myc, survivin and cyclin D1, which contributed to the inhibitory effect of acetylshikonin on HBVSMCs proliferation. Further, stimulation with recombinant Wnt3a dramatically reversed acetylshikonin-mediated inhibition of proliferation and cell cycle transition in HBVSMCs. Our study demonstrates that acetylshikonin prevents AngII-induced cerebrovascular smooth muscle cells proliferation and migration through inhibition of Wnt/β-catenin pathway, indicating that acetylshikonin may present a potential option for the treatment of cerebrovascular remodeling.