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染色体立体構造キャプチャ(3C)技術を使用して、3Dゲノム構造を調査できます。ただし、現在の方法での高いバックグラウンドノイズ、高コスト、および簡単な騒音評価の欠如は、3Dゲノム研究の進歩を妨げます。ここでは、ゲノムの3Dランドスケープを探索するための簡単な消化ライゲーションのみのHI-C(DLO HI-C)テクノロジーを開発しました。この方法では、ビオチンの標識とプルダウンを必要とせずに、2ラウンドの消化とライゲーションのみが必要です。特定のリンカーと結合されたDNAフラグメントを精製することにより、非統合DNAを費用対効果の高いステップで効率的に除去しました。特に、ランダムライゲーションは、シーケンス前の早期の品質管理ステップで迅速に評価できます。さらに、4カッター制限酵素を使用したDlo Hi-CのIn inituバージョンが開発されました。DLO HI-Cを適用して、THP-1およびK562細胞のゲノムアーキテクチャを描き、染色体転座を発見しました。この技術は、ゲノム組織、遺伝子調節、および(メタ)ゲノムアセンブリの調査を促進する可能性があります。
染色体立体構造キャプチャ(3C)技術を使用して、3Dゲノム構造を調査できます。ただし、現在の方法での高いバックグラウンドノイズ、高コスト、および簡単な騒音評価の欠如は、3Dゲノム研究の進歩を妨げます。ここでは、ゲノムの3Dランドスケープを探索するための簡単な消化ライゲーションのみのHI-C(DLO HI-C)テクノロジーを開発しました。この方法では、ビオチンの標識とプルダウンを必要とせずに、2ラウンドの消化とライゲーションのみが必要です。特定のリンカーと結合されたDNAフラグメントを精製することにより、非統合DNAを費用対効果の高いステップで効率的に除去しました。特に、ランダムライゲーションは、シーケンス前の早期の品質管理ステップで迅速に評価できます。さらに、4カッター制限酵素を使用したDlo Hi-CのIn inituバージョンが開発されました。DLO HI-Cを適用して、THP-1およびK562細胞のゲノムアーキテクチャを描き、染色体転座を発見しました。この技術は、ゲノム組織、遺伝子調節、および(メタ)ゲノムアセンブリの調査を促進する可能性があります。
Chromosome conformation capture (3C) technologies can be used to investigate 3D genomic structures. However, high background noise, high costs, and a lack of straightforward noise evaluation in current methods impede the advancement of 3D genomic research. Here we developed a simple digestion-ligation-only Hi-C (DLO Hi-C) technology to explore the 3D landscape of the genome. This method requires only two rounds of digestion and ligation, without the need for biotin labeling and pulldown. Non-ligated DNA was efficiently removed in a cost-effective step by purifying specific linker-ligated DNA fragments. Notably, random ligation could be quickly evaluated in an early quality-control step before sequencing. Moreover, an in situ version of DLO Hi-C using a four-cutter restriction enzyme has been developed. We applied DLO Hi-C to delineate the genomic architecture of THP-1 and K562 cells and uncovered chromosomal translocations. This technology may facilitate investigation of genomic organization, gene regulation, and (meta)genome assembly.
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