新規の抗調達剤ベンゾナテートとその主要な代謝物の遺伝毒性評価

ベンゾナテート（Tessalon®）は、末梢に作用する口腔抗抗である。4-（ブチルミノ）ベンゾ酸（BBA）およびメチル化ポリエチレングリコール（MPG）代謝物を生成する急速なエステル加水分解を受け、尿および糞便で除去されます。ベンゾナテートの非臨床的および臨床的有効性は、過去60年間に実証されていますが、その安全性は完全には評価されていません。この研究では、in vitro細菌逆逆変異およびin vivo微小核アッセイにおけるベンゾナテートとその主要な代謝物BBAの遺伝毒性をテストしました。染色体異常アッセイもベンゾナート酸塩およびBBAで実施されました。逆変異アッセイでは、ベンゾナテートとBBAが1.5-5000μg/プレート±S9代謝活性化を用意し、リバーテン剤/プレートの数をさまざまなコントロールと比較しました。それぞれベンゾナート酸およびBBA濃度25-2000および62.5-1930μg/mlを使用したヒト末梢血リンパ球を使用した染色体異常アッセイ。CBYB6F1マウス骨髄ミクロナクルスアッセイは、250mg/kg/日までの28日間の経口毒物学研究の一環として実施されました。処理された群における多色赤血球における小核の頻度を対照群と比較した。ベンゾナテートもBBAも、代謝活性化の有無にかかわらず、細菌株のいずれにおいても有意な変異原性を誘発しませんでした。また、ヒト染色体に生物学的に関連する構造的または数値異常は生成されませんでした。エステラーゼ活性から急速に産生されたベンゾナテートとそのBBAおよびMPG代謝産物は、微小核形成ポリクロマティック赤血球の発生率の有意な増加をもたらしませんでした。結論として、ベンゾナテートとその主要な代謝物BBAは変異原性ではなく、数値的または構造的な染色体の変化を引き起こしませんでした。MPG代謝産物はテストされていませんが、構造類似体に関する研究は、それが遺伝毒性である可能性も低いことを示しました。これは、悪性腫瘍の増加がないことを示す経口げっ歯類発がん性アッセイによってサポートされていました。

Benzonatate (TESSALON®) is a peripherally acting oral antitussive. It undergoes rapid ester hydrolysis producing 4-(butylamino) benzoic acid (BBA) and methylated polyethylene glycol (MPG) metabolites, which are eliminated in urine and feces. The nonclinical and clinical efficacy of Benzonatate has been demonstrated over the last 60 years, but its safety was not fully assessed. In this study, we tested the genotoxicity of Benzonatate and its major metabolite BBA in an in vitro bacterial reverse mutation and in vivo micronucleus assays. A chromosomal aberration assay was also performed on Benzonatate and BBA. In the reverse mutation assay, Benzonatate and BBA doses 1.5-5000 μg/plate ± S9 metabolic activation were used and the numbers of revertants/plate were compared to various controls. Chromosomal aberration assays with human peripheral blood lymphocytes used Benzonatate and BBA concentrations 25-2000 and 62.5-1930 μg/mL, respectively. A CByB6F1 mouse bone marrow micronucleus assay was performed as part of a 28-day oral toxicology study at up to 250 mg/kg/day. The frequencies of micronuclei in polychromatic erythrocytes in treated groups were compared with the control group. Neither Benzonatate nor BBA induced significant mutagenicity in any of the bacterial strains, with or without metabolic activation. They also did not produce any biologically relevant structural or numerical aberrations in human chromosomes. Benzonatate and its BBA and MPG metabolites rapidly produced from esterase activity did not produce any significant increase in the incidence of micronucleated polychromatic erythrocytes. In conclusion, Benzonatate and its major metabolite BBA were not mutagenic and did not cause numerical or structural chromosome alterations. While the MPG metabolite was not tested, studies on structural analogues indicated it was also unlikely to be genotoxic. This was supported by oral rodent carcinogenicity assays showing no increase in malignancies.