著名医師による解説が無料で読めます
すると翻訳の精度が向上します
アミロイド-β（Aβ）は、ベータセクレターゼ（BACE-1）およびガンマセクレターゼによるアミロイド前駆体タンパク質（APP）のタンパク質分解プロセシングによって生成されます。アミロイド-βは、アルツハイマー病（AD）における老人プラークの形成に関与しています。その結果、Aβの産生における速度制限酵素であるβ-セクレターゼ（BACE-1）の阻害は、ADの治療に対する魅力的な治療アプローチを構成します。このペーパーでは、BACE-1 FRET基質（Rh-Glu-val-asn-leu-asp-ala-glu-glu-lys-lys-quenchers-lys-quenchersを使用することによって達成されたβ-セクレターゼ阻害剤の高スループットスクリーニングのためのインクジェット印刷ベースの蛍光アッセイを報告します。）。このペプチド基質は、タンパク質分解活性のために容易に入手可能で適切な基質であることが知られており、BACE-1に対する親和性が高い。羊皮紙に印刷されたBACE-1ペプチド基板は、同じ場所に印刷されたBACE-1によって効果的に切断されました。このインクジェット印刷ベースのBACE-1アッセイに必要な酵素と基質の量は1.4°103未満である可能性があり、フェムトーモル効力を伴う阻害剤活性の評価を可能にします。インクジェットプリンティングベースのBACE-1阻害アッセイは、それぞれ1.00×10-15molおよび1.01×10-14molのIM50を伴うBACE-1に対する阻害剤IVおよびSTAの阻害効果を明らかにしました。これらのデータは、両方のBACE-1阻害剤（阻害剤IVおよびSTA）が羊皮紙のBACE-1基質のBACE-1タンパク質分解を積極的に阻害したことを確認しています。印刷ベースの酵素アッセイで使用されているBACE-1基質および酵素のモル数は、従来のウェルプレートアッセイで使用されている量よりも1.4ⅹ103が小さいことに注意することが重要です。インクジェット印刷ベースの阻害阻害アッセイは汎用性の高い高スループット技術を構成し、阻害剤のIM50値は満足のいく再現性で得られ、このインクジェット印刷BACE-1阻害アッセイは、新しい潜在的なBACE-1のスクリーニングに非常に適している可能性があることを示唆しています。ADの阻害剤。
アミロイド-β（Aβ）は、ベータセクレターゼ（BACE-1）およびガンマセクレターゼによるアミロイド前駆体タンパク質（APP）のタンパク質分解プロセシングによって生成されます。アミロイド-βは、アルツハイマー病（AD）における老人プラークの形成に関与しています。その結果、Aβの産生における速度制限酵素であるβ-セクレターゼ（BACE-1）の阻害は、ADの治療に対する魅力的な治療アプローチを構成します。このペーパーでは、BACE-1 FRET基質（Rh-Glu-val-asn-leu-asp-ala-glu-glu-lys-lys-quenchers-lys-quenchersを使用することによって達成されたβ-セクレターゼ阻害剤の高スループットスクリーニングのためのインクジェット印刷ベースの蛍光アッセイを報告します。）。このペプチド基質は、タンパク質分解活性のために容易に入手可能で適切な基質であることが知られており、BACE-1に対する親和性が高い。羊皮紙に印刷されたBACE-1ペプチド基板は、同じ場所に印刷されたBACE-1によって効果的に切断されました。このインクジェット印刷ベースのBACE-1アッセイに必要な酵素と基質の量は1.4°103未満である可能性があり、フェムトーモル効力を伴う阻害剤活性の評価を可能にします。インクジェットプリンティングベースのBACE-1阻害アッセイは、それぞれ1.00×10-15molおよび1.01×10-14molのIM50を伴うBACE-1に対する阻害剤IVおよびSTAの阻害効果を明らかにしました。これらのデータは、両方のBACE-1阻害剤（阻害剤IVおよびSTA）が羊皮紙のBACE-1基質のBACE-1タンパク質分解を積極的に阻害したことを確認しています。印刷ベースの酵素アッセイで使用されているBACE-1基質および酵素のモル数は、従来のウェルプレートアッセイで使用されている量よりも1.4ⅹ103が小さいことに注意することが重要です。インクジェット印刷ベースの阻害阻害アッセイは汎用性の高い高スループット技術を構成し、阻害剤のIM50値は満足のいく再現性で得られ、このインクジェット印刷BACE-1阻害アッセイは、新しい潜在的なBACE-1のスクリーニングに非常に適している可能性があることを示唆しています。ADの阻害剤。
Amyloid-β (Aβ) is generated by proteolytic processing of amyloid precursor protein (APP) by beta-secretase (BACE-1) and gamma-secretase. Amyloid-β is responsible for the formation of senile plaques in Alzheimer's disease (AD). Consequently, inhibition of β-secretase (BACE-1), a rate-limiting enzyme in the production of Aβ, constitutes an attractive therapeutic approach to the treatment of AD. This paper reports an inkjet printing-based fluorescence assay for high throughput screening of β-secretase inhibitors achieved by employing a BACE-1 FRET substrate (Rh-Glu-Val-Asn-Leu-Asp-Ala-Glu-Phe-Lys-Quencher). This peptide substrate is known to be a readily available and suitable substrate for proteolytic activity, and it has high affinity to BACE-1. The BACE-1 peptide substrate printed on parchment paper was effectively cleaved by BACE-1, which was printed on the same spot. The amount of enzyme and substrate required for this inkjet printing-based BACE-1 assay can be less than 1.4ⅹ103, permitting the evaluation of inhibitor activity with femtomolar potency. The inkjet-printing-based BACE-1 inhibitory assay revealed inhibitory effects of inhibitor IV and STA on BACE-1 with an IM50 of 1.00 × 10-15 mol and 1.01 × 10-14 mol, respectively. These data confirm that both BACE-1 inhibitors (inhibitor IV and STA) actively inhibited the BACE-1 proteolysis of BACE-1 substrate on parchment paper. It important to note that the number of mole of BACE-1-substrate and enzyme utilized in the printing-based enzymatic assay are 1.4ⅹ103 smaller than the amount used in the conventional well-plate assay. The inkjet printing-based inhibitory assay constitutes a versatile high throughput technique and the IM50 values of the inhibitors were obtained with satisfactory reproducibility, suggesting that this inkjet-printing BACE-1 inhibitory assay could be quite suitable for the screening of new potential BACE-1 inhibitors for AD.
医師のための臨床サポートサービス
ヒポクラ x マイナビのご紹介
無料会員登録していただくと、さらに便利で効率的な検索が可能になります。