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4-ニトロベンズアルデヒドは、合成原材料であり、クロラムフェニコールの重要な光分解生成物です。人間の遺伝毒性電位の構造的な「アラート」と報告された変異原性により、この化合物は潜在的な遺伝毒性不純物として薬物で制御する必要があります。ただし、現在の分析方法には、複雑な治療前のプロセスが必要であり、十分な特異性と感度が不足しています。ニトロフェニルヒドラジンは、薬物サンプルの残留芳香族アルデヒドを決定するために使用される一般的なカルボニル誘導体化試薬です。本研究では、誘導体化高性能液体クロマトグラフィー - ウルトラビオレット検出法の誘導体化試薬としての3-ニトロフェニルヒドロ塩酸塩の予期せぬ利点を、クロランプヘニコールサンプルの4-ニトロベンズアルデヒドを決定します。他のニトロ置換フェニルヒドラジンと比較して、3-ニトロフェニルヒドロジン塩酸塩は、その誘導体の最大吸収波長が397NMに大幅に赤方偏移しているため、薬物マトリックスと誘導体化試薬干渉を最小限に抑えることができます。誘導体化条件は、実験の設計を通じて、反応温度、時間、溶媒の希釈など、反応効率の観点から最適化されています。その結果、アセトニトリル水(70:30、v/v)で60°Cで30分間の3ニトロフェニルヒドロジン(70:30、v/v)における500μgml-1の塩酸塩との反応の後、0.009μgml-1の限界を持つ4-ニトロベンズアルデヒドを決定するために、開発されたHPLC法を使用できます。次に、この方法を検証し、クロラムフェニコールとそのアイドロップサンプルに残っている4-ニトロベンズアルデヒドの決定に適用されました。
4-ニトロベンズアルデヒドは、合成原材料であり、クロラムフェニコールの重要な光分解生成物です。人間の遺伝毒性電位の構造的な「アラート」と報告された変異原性により、この化合物は潜在的な遺伝毒性不純物として薬物で制御する必要があります。ただし、現在の分析方法には、複雑な治療前のプロセスが必要であり、十分な特異性と感度が不足しています。ニトロフェニルヒドラジンは、薬物サンプルの残留芳香族アルデヒドを決定するために使用される一般的なカルボニル誘導体化試薬です。本研究では、誘導体化高性能液体クロマトグラフィー - ウルトラビオレット検出法の誘導体化試薬としての3-ニトロフェニルヒドロ塩酸塩の予期せぬ利点を、クロランプヘニコールサンプルの4-ニトロベンズアルデヒドを決定します。他のニトロ置換フェニルヒドラジンと比較して、3-ニトロフェニルヒドロジン塩酸塩は、その誘導体の最大吸収波長が397NMに大幅に赤方偏移しているため、薬物マトリックスと誘導体化試薬干渉を最小限に抑えることができます。誘導体化条件は、実験の設計を通じて、反応温度、時間、溶媒の希釈など、反応効率の観点から最適化されています。その結果、アセトニトリル水(70:30、v/v)で60°Cで30分間の3ニトロフェニルヒドロジン(70:30、v/v)における500μgml-1の塩酸塩との反応の後、0.009μgml-1の限界を持つ4-ニトロベンズアルデヒドを決定するために、開発されたHPLC法を使用できます。次に、この方法を検証し、クロラムフェニコールとそのアイドロップサンプルに残っている4-ニトロベンズアルデヒドの決定に適用されました。
4-Nitrobenzaldehyde is the synthetic raw material and an important photodegradation product of chloramphenicol. With a structural "alert" of human genotoxic potential and reported mutagenicity, this compound should be controlled in drug substances as a potential genotoxic impurity. However, current analysis methods require complex pre-treatment processes and/or lack sufficient specificity and sensitivity. Nitrophenylhydrazine is a common carbonyl derivatization reagent used to determine the residual aromatic aldehydes in drug samples. In the present study, we report an unexpected advantage of 3-nitrophenylhydrazine hydrochloride as a derivatization reagent in the derivatization high-performance liquid chromatography-ultraviolet detection method to determine 4-nitrobenzaldehyde in chloramphenicol samples. Compared with other nitro-substituted phenylhydrazines, 3-nitrophenylhydrazine hydrochloride can minimize drug matrix and derivatization reagent interferences, since the maximum absorption wavelength of its derivative is significantly red-shifted to 397 nm. The derivatization conditions have been optimized in terms of reaction efficiency, including reaction temperature, time, and diluting solvent, through a design of experiments. As a result, after reaction with 500 μg mL-1 of 3-nitrophenylhydrazine hydrochloride in acetonitrile-water (70:30, v/v) at 60 °C for 30 min, the developed HPLC method could be used to determine 4-nitrobenzaldehyde with a limit of detection of 0.009 μg mL-1. The method was then validated and applied for the determination of residual 4-nitrobenzaldehyde in chloramphenicol and its eye-drop samples.
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