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目的：自動化された免疫組織化学（IHC）における不均一な染色（UES）の発生は、臨床検査室が経験しており、スライドコントロールで最適に染色された存在にもかかわらず、IHCアッセイの読み取り、解釈、および報告を混乱させる可能性があります。ただし、さまざまな自動化されたIHCプラットフォームとのタイプ、頻度、および関連に関して、この現象の研究はありません。臨床診療からの実世界の例を備えた自動IHCアッセイでのUEの発生と、自動IHC機器のベースラインと定期的な性能を監視するために実験室開発方法を使用して研究しました。 材料と方法：ホルマリン固定のパラフィン包埋された正常肝臓組織のセクションを180のガラススライドに取り付け、6つの自動IHC機器（3つの異なるメーカーの4つの異なるモデル）にHEPPAR1用に染色しました。染色の巨視的および微視的な欠陥が記録されました。 結果：スライドの8％のみが完全に均一な染色を示しました。染色の増加と減少の両方の領域を含むUEは、すべての機器で発生しました。染色の減少はしばしばゾーンであり、スライドの大きな領域を伴いました。染色の減少は、主に機器依存的に局在しています。染色の増加は、ランダムな分布で小さな病巣で発生する傾向がありました。 結論：UESの一般的な発生（特に染色の減少）は、生検サンプルでのIHCアッセイの信頼できる読み取りに重要な意味を持ちます。すべての自動IHC機器には、UESのベースラインおよび定期的な品質保証テストが推奨されます。
目的：自動化された免疫組織化学（IHC）における不均一な染色（UES）の発生は、臨床検査室が経験しており、スライドコントロールで最適に染色された存在にもかかわらず、IHCアッセイの読み取り、解釈、および報告を混乱させる可能性があります。ただし、さまざまな自動化されたIHCプラットフォームとのタイプ、頻度、および関連に関して、この現象の研究はありません。臨床診療からの実世界の例を備えた自動IHCアッセイでのUEの発生と、自動IHC機器のベースラインと定期的な性能を監視するために実験室開発方法を使用して研究しました。 材料と方法：ホルマリン固定のパラフィン包埋された正常肝臓組織のセクションを180のガラススライドに取り付け、6つの自動IHC機器（3つの異なるメーカーの4つの異なるモデル）にHEPPAR1用に染色しました。染色の巨視的および微視的な欠陥が記録されました。 結果：スライドの8％のみが完全に均一な染色を示しました。染色の増加と減少の両方の領域を含むUEは、すべての機器で発生しました。染色の減少はしばしばゾーンであり、スライドの大きな領域を伴いました。染色の減少は、主に機器依存的に局在しています。染色の増加は、ランダムな分布で小さな病巣で発生する傾向がありました。 結論：UESの一般的な発生（特に染色の減少）は、生検サンプルでのIHCアッセイの信頼できる読み取りに重要な意味を持ちます。すべての自動IHC機器には、UESのベースラインおよび定期的な品質保証テストが推奨されます。
OBJECTIVES: The occurrence of uneven staining (UES) in automated immunohistochemistry (IHC) has been experienced by clinical laboratories and has the potential to confound readout, interpretation, and reporting of IHC assays despite the presence optimally stained on-slide controls. However, there are no studies of this phenomenon in regard to the type, frequency, and association with different automated IHC platforms. We studied the occurrence of UES in automated IHC assays with real world examples from clinical practice and by using a laboratory developed methodology to monitor baseline and periodic performance of automated IHC instruments. MATERIALS AND METHODS: Sections of formalin-fixed, paraffin-embedded normal liver tissue were mounted on 180 glass slides and stained for HepPar1 on 6 automated IHC instruments (4 different models from 3 different manufacturers). Macroscopic and microscopic defects of staining were recorded. RESULTS: Only 8% of slides showed completely uniform staining. UES, including areas of both increased and decreased staining, occurred with all instruments. Decreased staining was often zonal, involving large regions of the slide. Decreased staining mostly localized in an instrument-dependent manner. Increased staining tended to occur in small foci with a random distribution. CONCLUSIONS: The common occurrence of UES (particularly decreased staining) has important implications for the reliable read-out of IHC assays on biopsy samples. Baseline and periodic quality assurance testing for UES is recommended for all automated IHC instruments.
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