増殖のモジュレーターのための表現型スクリーニングのための骨格筋幹細胞の分離

成体の骨格筋には、筋肉幹細胞（MUSC）または衛星細胞として知られる居住幹細胞の集団が含まれています。この細胞集団は、損傷後の機能的筋線維の再生に必要です。老化は、負傷後の衛星細胞の増殖反応を減らします。この不十分な反応は、高齢者の損傷後の筋肉機能の回復が遅くなることに寄与すると考えられており、筋肉機能の年齢に関連した喪失（サルコペニア）にも寄与する可能性があります。マウスとヒトからの高度に精製された衛星細胞の分離には、多くの技術が利用可能になりました（Sherwood、etal。Cell119：543-554、2004; Cerletti、etal。Cell134：37-47; 2008; Conboy、et al。MolBiol621：165-173、2010; Bareja、etal。PlosOne 9：E90398; 2014; Castiglioni etal。StemCell Rep 2：92-106、2014; Charville、etal。StemCell Rep 5：621-632、2015; Liu etal。NatProtoc 10：1612-1624、2015; Sincennes etal。MetherMol Biol 1556：41-50、2017）。衛星細胞の増殖と分化。この章では、小分子の集中セットの表現型スクリーンで最近使用したマウス衛星細胞の前向き分離の手法について説明します。

Adult skeletal muscle contains a population of resident stem cells known as muscle stem cells (MuSC) or satellite cells. This population of cells is required for regeneration of functional myofibers after damage. Aging reduces the proliferative response of satellite cells post-injury. This deficient response is thought to contribute to slowed recovery of muscle function after damage in the elderly and may also contribute to age-related loss of muscle function (sarcopenia). Numerous techniques are now available for the isolation of highly purified satellite cells from mice and humans (Sherwood, et al. Cell 119:543-554, 2004; Cerletti, et al. Cell 134:37-47; 2008; Conboy, et al. Methods Mol Biol 621:165-173, 2010; Bareja, et al. PLoS One 9:e90398; 2014; Castiglioni et al. Stem Cell Rep 2:92-106, 2014; Charville, et al. Stem Cell Rep 5:621-632, 2015; Liu et al. Nat Protoc 10:1612-1624, 2015; Sincennes et al. Methods Mol Biol 1556:41-50, 2017), thus opening an opportunity to use satellite cells in phenotypic screens for regulators of satellite cell proliferation and differentiation. In this chapter, we describe a technique for the prospective isolation of mouse satellite cells that we have recently used in a phenotypic screen of a focused set of small molecules.