ヒト膵臓ベータ細​​胞の増殖の誘導者を識別する細胞ベースの方法

糖尿病は、膵臓ベータ細​​胞のみまたはインスリン抵抗性と組み合わせた不足または機能不全の結果です。ベータ細胞の置換または再生は、人間とげっ歯類の糖尿病を効果的に逆転させることができます。したがって、膵臓ベータ細​​胞の増殖を促進する新しい小分子の同定は、糖尿病療法の魅力的なアプローチです。多数のホルモン、小分子、および成長因子はげっ歯類のベータ細胞を駆動して複製することができますが、人間のベータ細胞の増殖を刺激する能力を実証したのは少数の小分子のみです。したがって、成人のヒトベータ細胞の再生と拡大を誘導する治療剤が緊急に必要です。ここでは、コーティングチャンバースライドの詳細なプロトコル、一次膵島の培養、膵島細胞分離の実行、チャンバースライドの播種細胞、膵島細胞の化合物の処理、またはアデノウイルス、増殖マーカーの免疫染色、およびイメージング、およびデータ分析を説明します。

Diabetes is the result of the insufficiency or dysfunction of pancreatic beta cells alone or in combination with insulin resistance. The replacement or regeneration of beta cells can effectively reverse diabetes in humans and rodents. Therefore, the identification of novel small molecules that promote pancreatic beta-cell proliferation is an attractive approach for diabetic therapy. While numerous hormones, small molecules, and growth factors are able to drive rodent beta cells to replicate, only a few small molecules have demonstrated the ability to stimulate human beta-cell proliferation. Hence, there is an urgent need for therapeutic agents that induce regeneration and expansion of adult human beta cells. Here, we describe a detailed protocol for coating chamber slides, culturing primary islets, performing islet cell disassociation, seeding cells on chamber slides, treating islet cells with compounds or infecting them with adenovirus, immunostaining of proliferation markers and imaging, and data analysis.