慢性シャーガス病の血清学的診断のための新しい抗原を特定するための免疫原性スクリーニングアプローチ

血清学的検査は、慢性段階でのチャガス病（CD）の診断に優先的に使用され、寄生性が低く、抗トリパノソーマクルジ抗体の力価が高いためです。しかし、現在の方法は、主に使用される抗原の特性に関連する矛盾または決定的な結果として、抗原生産プロトコルと血清学的試験で使用される実験条件に関連するいくつかの欠点を示しました。したがって、より良い品質の血清学的アッセイが緊急に必要です。ここでは、T。cruzi株のゲノム配列に基づいて、予測されたプロテオームで保存された線形B細胞エピトープを慢性CDの血清掘削に合成ペプチドとして適用するために、幅広い免疫原性スクリーニング戦略を実行しました。ムチン関連表面タンパク質（MASP）ファミリーに由来する3つのB細胞エピトープは、感染性寄生虫段階、トリポマスチゴート、アマスティゴテの両方で発現し、T。cruzi株で保存され、リーシュマニアSPPと比較して非常に多様です。プロテオームは、この研究のために選択されました。結果は、合成ペプチド2とペプチドの混合物（混合II：ペプチド2および3）がすべての慢性CD症例、不定またはチャガス心筋症の臨床症状を特定し、同時にリーシュマニア寄生虫によって引き起こされる感染症を識別できることを実証しました。ブラジルの参照研究所が実施した現在の診断パイプラインと比較して、直接的な方法を使用して、正確性（それぞれ98.37および100.00％）と直接的な方法を使用した合意（それぞれKappa Index = 0.967および1.000）。この研究は、感染症の血清学的診断に適用される新しい抗原の発見と、診断テストの大規模生産のためのプラットフォームの技術開発のための興味深い戦略を表しています。

Serological tests are preferentially used for the diagnosis of Chagas' disease (CD) during the chronic phase because of the low parasitemia and high anti-Trypanosoma cruzi antibody titers. However, the current methods showed several disadvantages, as contradictory or inconclusive results, mainly related to the characteristics of the antigens used, in general, crude or whole parasites, but also due to antigen production protocol and the experimental conditions used in serological tests. Thus, better-quality serological assays are urgently needed. Here, we performed a wide immunogenomic screen strategy to identify conserved linear B-cell epitopes in the predicted proteome based on genome sequence from T. cruzi strains to will be applied as synthetic peptides in the serodiagnosis of the chronic CD. Three B-cell epitopes derived from mucin-associated surface protein (MASP) family, expressed in both infective parasite stages, trypomastigote and amastigotes, conserved in T. cruzi strains, and highly divergent as compared with Leishmania spp. proteome, were selected for this study. The results demonstrated that synthetic peptide 2 and a mixture of peptides (Mix II: peptides 2 and 3) were able to identify all chronic CD cases, indeterminate or Chagas cardiomyopathy clinical presentation, and simultaneously able to discriminate infections caused by Leishmania parasites, with high accuracy (98.37 and 100.00%, respectively) and agreement (kappa index = 0.967 and 1.000, respectively) with direct methods as compared to current diagnostic pipeline performed by reference laboratories in Brazil. This study represents an interesting strategy for the discovery of new antigens applied to serologic diagnosis of infectious diseases and for the technological development of platforms for large-scale production of diagnostic tests.