NOX由来のROS経路を介した年齢/怒り誘発EMPリリース

目的：糖尿病は、循環内皮微粒子（EMP）に広く見られる進行糖系最終生成物（AGE）の加速形成に関連しています。この研究の目的は、年齢がEMP形成に直接的な影響を及ぼし、根本的なメカニズムの可能性を調査することを目的としています。 方法：in vitroで、培養されたヒト臍静脈内皮細胞（HUVEC）を、抗RAGE抗体、NOx阻害剤、またはROSスカベンジャーとの前処理の有無にかかわらず、年齢（200および400μg/mL）と24時間インキュベートしました。CD31陽性EMPの数は、フローサイトメトリーによって評価されました。 結果：EMPの数は、年齢によって刺激されたHUVECで大幅に増加しました。さらに、年齢の受容体（RAGE）、NAD（P）Hオキシダーゼ（NOx）、および反応性酸素種（ROS）は、対照群と比較して年齢によって増加しました。これらの変化は、Huvecを抗RAGE抗体で前処理した場合に逆転する可能性があります。さらに、NOXの阻害と抗酸化治療は、年齢によって誘導されるEMPの放出を減少させました。 結論：私たちの研究は、AGがEMP生成を増加させ、NOX由来のROSを介した怒りのシグナル伝達によって媒介されることを示唆しました。

OBJECTIVE: Diabetes is associated with accelerated formation of advanced glycation end products (AGEs) that are extensively found in circulating endothelial microparticles (EMPs). This study aimed to investigate whether AGEs have a direct effect on EMP formation and the possible underlying mechanism. METHODS: In vitro, cultured human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) were incubated with AGEs (200 and 400 μg/ml) for 24 hours with or without pretreatment with anti-RAGE antibody, NOX inhibitor, or ROS scavenger. The number of CD31-positive EMPs was assessed by flow cytometry. RESULTS: The number of EMPs was significantly increased in HUVECs stimulated by AGEs in a dose-dependent manner. In addition, receptors for AGEs (RAGE), NAD(P)H oxidase (NOX), and reactive oxygen species (ROS) were increased by AGEs as compared to the control group. These changes could be reversed when HUVECs were pretreated with anti-RAGE antibody. Moreover, inhibition of NOX as well as antioxidant treatment reduced the release of EMPs induced by AGEs. CONCLUSION: Our study suggested that AGEs increased EMP generation, which was mediated by RAGE signaling through NOX-derived ROS.